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Relatório Extração De Dna

Trabalho Escolar: Relatório Extração De Dna
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Enviado por:  Maria  24 novembro 2011
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Palavras: 729   |   Páginas: 3
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nucléicos podem, então, ser separados de macromoléculas através de solubilização em solventes orgânicos, seguida de precipitação por resfriamento, por exemplo.

Objetivo

Extrair e observar o DNA presente nas células da cebola.

Materiais e reagentes

* 0,5 cebola picada

* 1 colher de sopa

* 1 colher de café de NaCl

* Álcool etílico

* Água destilada

* Béquer

* Gelo

* Manta térmica

* Gaze

* Funil

* Bastão de vidro.

*

*

Procedimento

* Preparou-se em um béquer, uma solução de 50 mL contendo 1 colher de sopa de detergente, 1 colher de café de cloreto de sódio e água destilada.

* Adicionou-se a cebola picada à solução e aqueceu-a,

* Com o auxilio de um funil e de gazes filtrou-se a solução a quente;

* Coletou-se a solução em um outro béquer e aplicou-se um choque térmico mergulhando-o em banho de gelo;

* Esperou-se cerca de 10 min, até a solução esfriar e adicionou a ela, álcool gelado e observou-se.

Resultados e Discussão

A utilização da solução contendo detergente é com o objetivo de lisar a célula, já que sua membrana é constituída de fosfolipídios moléculas que se dissolvem no detergente, rompendo a célula.

E a utilização do NaCl possibilita a precipitação dos ácidos nucleicos em solução alcoólica e favorece a aglomeração das moléculas de DNA.

A solução é aquecida para aumentar a solubilidade da membrana celular na solução e evitar a ação das enzimas que degradam o DNA (DNAses), pois elas sofrem desnaturação perdendo sua função.

Depois de aquecida, a solução é exposta a um choque térmico para que mantenha “inativadas” as proteínas e as enzimas. A diminuição brusca da temperatura desfavorece ainda a interação entre as fitas da molécula de DNA, mantendo-as abertas no meio.

Ainda a quente, realiza-se a filtração com o objetivo de separar a parte sólida (cebola) da fase a ser utilizada.

A adição do etanol (gelado para manter a temperatura do meio) ao filtrado, provoca a precipitação do DNA, pois este possui

baixa solubilidade em solventes polares e quanto menor a temperatura menor a solubilidade.

Com auxilio de uma bastão de vidro, pôde-se “arrastar” uma quantidade de fita de DNA já que ela estava insolúvel em solução e pôde-se observá-la a olho nu, evidenciando que o processo permite a extração de grande quantidade do ácido desoxirribonucléico.

Conclusão

O procedimento realizado proporciona a obtenção de uma quantidade significativa de DNA embora, segundo a literatura, seja impuro.

Referências

* MARZZOCO, A.; TORRES B.B. , Bioquímica Básica, 3ª Ed., Guanabara Koogan.

* Berg, M.J.; Bioquímica, sexta edição, Guanabara Koogan. ...



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