Preparo De Soluções
Monografias: Preparo De Soluções. Pesquise 860.000+ trabalhos acadêmicosPor: beatricemacente • 23/7/2014 • 4.605 Palavras (19 Páginas) • 414 Visualizações
REAGENTES E SOLUÇÕES
1- TRIS HCl 1M pH 7,65
Volume : 1 litro
Tris base: 121,11g
Ajustar pH /,65 c/ HCl (= 4 ml).
q.s.p. 1000 ml c/ ddH2O.
Autoclavar.
2- TRIS 1M pH 8,0
Volume: 1 litro
Tris base: 121,11g
Ajustar pH 8,0 c/ HCl (=42 ml).
q.s.p. 1000 ml c/ ddH2O.
3- TRIS 1M pH 7,5
Volume: 100 ml
Tris base: 12,11g
Ajustar pH 7,5 c/ HCl (= 5,0 ml).
q.s.p. 100 ml c/ H2O.
Autoclavar e estocar em alíquotas.
4- EDTA 0,5M pH 8,0 (SIGMA - Obs.: Para DNA)
Volume: 50 ml
EDTA: 9,305g (PM = 372,22)
Ajustar pH = 8,0 com NaOH pellet ou concentrado até dissolver.
Após dissolução, terminar de ajustar com NaOH conc. até pH 8,0.
q.s.p. 50 ml c/ ddH2O.
Autoclavar e aliquotar.
5- EDTA 0,5M pH 8,0 (RIEDEL - Obs.: Para tampão de corrida)
Volume: 200 ml
EDTA 2H2O: 37,22g
Ajustar pH até próximo de 8,0 c/ NaOH pellet até dissolver.
Após dissolução ajustar pH 8,0 com NaOH conc.
q.s.p. 200 ml com ddH2O.
Autoclavar.
6- NaCl 5,0M
Volume: 100 ml
NaCl: 29,22g
q.s.p. 100 ml com ddH2O.
Autoclavar.
7- MgCl 5,0M
Volume: 100 ml
MgCl2.6H2O: 20,33g
q.s.p. 100 ml.
Autoclavar.
8- DTT - DITHIOTHREITOL
Volume: 5 ml
DTT: 0,773g
q.s.p. 5 ml com água estéril.
Aliquotar em microtubos e estocar a -20ºC.
9- SDS ( sodium dodecil sulfate - sigma - nuclease free )
Volume: 10 ml
SDS: 1g
Aquecer a 68ºC para dissolver e ajustar pH 7,2 com HCl diluído.
q.s.p. 10 ml com ddH2O estéril.
OBS.: Usar máscaras para pesar o SDS (IRRITANTE DE MUCOSA).
Vidraria ao forno.
10- SDS 10% P LAVAGEM DE MEMBRANAS
Volume: 200 ml
SDS: 20g
Dissolver em 150 ml de ddH2O estéril e aquecer a 68ºC.
q.s.p. 200 ml com ddH2O estéril.
11- ACOONH4 4 M - ACETATO DE AMÔNIO
Volume: 100 ml
ACOONH4: 30,8g
q.s.p. 100 ml com ddH2O estéril.
Esterilizar por filtração.
12- ACOONH4 7,5 M
Volume: 100 ml
ACOONH4: 57,75g
q.s.p. 100 ml com ddH2O estéril.
Esterilizar por filtração.
13- 20X SSC ( NaCl 3M / Citrato Trissódico.2H2O 0,3M)
Volume: 4 litros
NaCl: 701,2g
Citrato: 352,9g
Ajustar pH 7,0 com HCl.
q.s.p. 4000 ml.
Autoclavar.
14- BROMETO DE ETÍDIO ( MUTAGENICO ) 10 mg/ml
USAR MÁSCARAS E LUVAS, E PESAR EM CAPELA DE EXAUSTÃO
Volume: 10 ml
BROMETO DE ETÍDIO: 100 mg
q.s.p. 10 ml com ddH2O estéril.
Agitar até dissolução.
Estocar a 4ºC, no escuro.
15- NaOH 1M
Volume: 100 ml
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