Relatório De Aula Pratica

FACULDADE DE CIÊNCIAS E TECNOLOGIA DO MARANHÃO – FACEMA

FABIANA LOPES

COLORAÇÃO DE GRAM

(Relatório Técnico-Científico)

CAXIAS-MA

2014

SUMÁRIO

1. INTRODUÇÃO 3

2. OBJETIVOS 4

3. MATERIAL 4

4. METODOLOGIA 4

5. RESULTADOS 4

6. DISCUSSÃO 5

7. CONSIDERAÇÕES FINAIS 5

REFERÊNCIAS 6

 

1. INTRODUÇÃO

Coloração de Gram é uma técnica de coloração para diferenciação de microorganismos através das cores, para serem observados em microscópio óptico. A técnica recebeu este nome em homenagem ao médico dinamarquês Hans Cristian Joaquim Gram. Por volta de 1884, Hans Gram observou que as bactérias, após serem tratadas com diferentes corantes, adquiriram cores diferenciadas. Assim, as que ficavam roxas foram classificadas de Gram-positivas, e as que ficavam vermelhas, foram chamadas de Gram-negativas. A técnica de Gram é fundamental para a taxonomia e identificação das bactérias, sendo muito utilizada atualmente, como técnica de rotina em laboratórios de bacteriologia.

Os resultados após a coloração de Gram permitem classificar as bactérias em dois grupos: gram positivo e gram negativo

Quando as estruturas celulares são cobertas pelo corante violeta-de-metila, todas se coram em roxo. Com a adição do mordente (Soluto de Lugol), ocorre à formação do complexo iodo-pararosanilina, que tem como propriedade fixar o corante primário nas estruturas coradas. Algumas estruturas perdem a cor violeta rapidamente, quando ocorre a lavagem, com ácool etílico, enquanto outras perdem sua coloração mais devagar ou a perdem completamente. O corante safranina colore novamente as estruturas que foram descoradas.

As bactérias Gram-positivas, que têm a parede celular composta por mureína (peptídeoglicano - peptídeo de ácido n-acetil murâmico), durante o processo de descoloração com álcool etílico, retém o corante, permanecendo com a coloração conferida pelo corante primário (roxo). Já as bactérias Gram-negativas com parede celular composta predominantemente por ácidos graxos (lipopolissacarídeos e lipoproteínas), perdem o complexo iodo-pararosanilina, são incapazes de reter o violeta de Genciana, assumindo a cor do corante de fundo (vermelha).

São as diferenças da estrutura da parede bacteriana, principalmente com relação à espessura da camada de peptidoglicano, que é responsável pelo diferente comportamento das bactérias diante da coloração de Gram.

 

2. OBJETIVOS

 Executar a técnica da coloração de Gram

3. MATERIAL

 Kit para gran

 Lâminas de vidro

 Swabs

 Microscópio

4. METODOLOGIA

Usando o swabs foi retirada uma amostra da mucosa do nariz, boca, ouvido e da pia e posteriormente depositados na lâmina. O material foi espalhado na lâmina, técnica do esfregaço, com o swabs em movimento circular e adicionado salina; em seguida o material contido na lamina foi levado ao bico de Bunsen, para secá-la e fixar, de modo que a lâmina não ficasse diretamente a chama, para danificar o material para a pesquisa.