CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR E FENOTÍPICA DE Staphylococ-cus COAGULASE-NEGATIVO ISOLADOS DA UNIDADE DE TERAPIA INTENSIVA NEONATAL DE UM HOSPITAL PÚBLICO DA CIDADE DE DOURADOS/MS

UNIVERSIDADE FEDERAL DA GRANDE DOURADOS

FACULDADE DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E AMBIENTAIS

GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA

MURILO DE ASSIS POSTAUE

CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR E FENOTÍPICA DE Staphylococcus COAGULASE-NEGATIVO ISOLADOS DA UNIDADE DE TERAPIA INTENSIVA NEONATAL DE UM HOSPITAL PÚBLICO DA CIDADE DE DOURADOS/MS

DOURADOS/MS

2018

MURILO DE ASSIS POSTAUE

CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR E FENOTÍPICA DE Staphylococcus COAGULASE-NEGATIVO ISOLADOS DA UNIDADE DE TERAPIA INTENSIVA NEONATAL DE UM HOSPITAL PÚBLICO DA CIDADE DE DOURADOS/MS

Trabalho de Conclusão de Curso, aprovado pela Banca Examinadora como requisito parcial da obtenção do título de Bacharel em Biotecnologia, da Universidade Federal da Grande Dourados.

Aprovado em: 10/12/2018

BANCA EXAMINADORA

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Prof.ª Dr.ª Silvana Beutinger Marchioro

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Me. Marcelo dos Santos Barbosa

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Prof.a Dra. Suzana Meira Ribeiro

DOURADOS/MS

2018

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DEDICATÓRIA

Dedico este trabalho a Lara Ramalho Simonetti, que foi minha amiga durante todas as melhores e piores fases de minha vida, compartilhando dos bons momentos e me consolando e ajudando a seguir em frente nos maus momentos. Imortalizo em palavras o quanto você foi e é especial para mim, e espero que esta oferta, um trabalho tão importante para mim, seja o suficiente como entrada para tudo que devo a você.

AGRADECIMENTOS

A meus amigos Igor, Caroline, Matheus, Maria, Thalles, Leticia, Carolina, Marcelo, Rafaela e Lara, que me acompanharam durante todo o caminho, servindo de apoio para me tornar a pessoa que sou hoje.

A Universidade Federal da Grande Dourados, seu corpo docente e administração, que proporcionaram um ambiente de qualidade para obtenção de conhecimento do qual sem ele não seria possível a conclusão deste trabalho, e o auxílio financeiro de bolsa de Iniciação Cientifica.

A minha orientadora Silvana Beutinger Marchioro, pelo suporte e tempo cedido exclusivamente para minha formação.

Aos meus pais, Elciane e Ali, pelo amor, incentivo e apoio incondicional.

Aos colegas de laboratório, Marcelo, Carolina, Caroline, Leticia, Andressa e Gleyce que me ensinaram muito durante os anos de convivência e trabalho.

A professora Cláudia, que sempre acolheu todos seus alunos como filhos e se dedica dia e noite para dar o melhor e da forma mais tranquila possível para seus “pequenos”.

A Emily, por ter feito os dias estressantes e cansativos serem mais leves e alegres.

E a todos que participaram e auxiliaram de forma direta e indireta em minha formação como acadêmico e pessoa, meu muito obrigado.

EPÍGRAFE

“As coisas não precisam ter acontecido para serem verdadeiras. Contos e sonhos são as sombras de verdades que irão resistir quando os meros fatos forem poeira e cinzas, e esquecidos.”

Sandman – Neil Gaiman

SUMÁRIO

1. INTRODUÇÃO.......................................................................................................13

2. REVISÃO BIBLIOGRÁFICA..................................................................................15

2.1. Gênero Staphylococcus sp.......................................................................15

2.2. Staphylococcus coagulase-negativo........................................................16

2.3. Resistência a antimicrobianos em Staphylococcus coagulase-negativo mediada pelos genes mecA e femA.................................................................................18

2.4. Biofilme .....................................................................................................20

2.5. Infecções hospitalares associadas a recém-nascidos...............................21

3. OBJETIVOS...........................................................................................................23

3.1. Objetivo geral............................................................................................23

3.2. Objetivos específicos................................................................................23

4. MATERIAL E METODOS.......................................................................................24

4.1. Coleta e análise preliminar das amostras..................................................24

4.2. Extração de DNA.......................................................................................24

4.3. Reação em cadeia da polimerase.............................................................25

4.4. Teste de aderência em placa....................................................................26

5. RESULTADOS E DISCUSSÃO..............................................................................28

6. CONCLUSÃO.........................................................................................................34

7. REFERÊNCIAS......................................................................................................35

INDÍCE DE ABREVIATURAS E SIGLAS

AIDS – Síndrome da Imunodeficiência Adquirida

ANVISA – Agência Nacional de Vigilância Sanitária

BHI – Infusão cérebro coração

DNA – Ácido Desoxirribonucleico

EDTA – Ácido Etilenodiaminotetracético

femA – Fator Essencial para Resistência a Meticilina

LPCS – Laboratório de Pesquisa em Ciências da Saúde

MS – Mato Grosso do Sul

nucA – Precursor de Termonuclease A

pb – Pares de Base

PBP – Proteína Ligadora de penicilina

PBP2’ – Proteína Ligadora de Penicilina 2’

PIA – Polissacarídeo de adesina intercelular