DETERMINAÇÃO DOS PARÂMETROS KINETICOS

• INTRODUÇÃO

O ESTUDO DA CINÉTICA ENZIMÁTICA PROPORCIONA UMA MELHOR COMPREENSÃO DO MECANISMO DE AÇÃO DAS ENZIMAS.A RELAÇÃO ENTRE A CONCENTRAÇÃO DE SUBSTRATO E A VELOCIDADE DA REAÇÃO ENZIMÁTICA PODE SER MOSTRADA POR GRÁFICOS.ACIMA DE UMA DETERMINADA CONCENTRAÇÃO DE SUBSTRATO, VARIÁVEL PARA CADA ENZIMA, A VELOCIDADE MÁXIMA NÃO AUMENTA SENSIVELMENTE, A ENZIMA ENCONTRA-SE SATURADA.A CONCENTRAÇÃO DE SUBSTRATO NECESSÁRIA PARA SE OBTER METADE DA VELOCIDADE MÁXIMA É CHAMADA DE CONSTANTE DE MICHAELIS(KM).

NAS REAÇÕES ENZIMÁTICAS, A INFLUÊMCIA DA VARIAÇÃO DE PH, DE TEMPERATURA, DA CONCENTRAÇÃO DE ENZIMA E DO TEMPO DE REAÇÃO.A ATIVIDADE CATALITICA DAS ENZIMAS É EVIDENCIADA NUMA FAIXA MAIS OU MENOS ESTREITA DE PH, VARIÁVEL PARA CADA ENZIMA.

O PH EM QUE A ATIVIDADE DE UMA ENZIMA É MÁXIMA, É CHAMADA PH ÓTIMO.EM BIXA TEMPERATURA, A RELAÇÃO ENZIMÁTICA PROCESSA-SE MUITO LENTAMENTE; SUA VELOCIDADE AUMENTA COM O AUMENTO DA TEMPERATURA ATÉ ATINGIR A TEMPERATURA ÓTIMA DA ENZIMA (QUANDO A ATIVIDADE É MÁXIMA). A VELOCIDADE DA REAÇÃO ENZIMÁTICA DIMINUI PELA DESNATURAÇÃO DA PROTEINA EM TEMPERATURA ELEVADA.

• OBJETIVOS

DETERMINAR PARÂMETROS CINÉTICOS

1. PH ÓTIMO;

2. TEMPERATURA ÓTIMA;

3. ESTABILIDADE TÉRMICA;

4. CONCENTRAÇÃO DE SUBSTRATO;

RESULTADOS (PH)

Conclusão

RESULTADOS

DETERMINAÇÃO TEMPERATURA ÓTIMA

REALISADO ANÁLISES DA TEMPERATURA ÓTIMA EM LABORATÓRIO, PORÉM O RESULTADO NÃO FOI SATISFATÓRIO A LEITURA DA ABSORBÂNCIA NA TEMPERATURA DE 30°C A 80°C. OCORREU UMA DESNATURAÇÃO DA ENZIMA ENTRE AS TEMPERATURAS DE 70°C A 80°C.

RESULTADOS

DETERMINAÇÃO CONCENTRAÇÃO DE SUBSTRATO, REALISADO ANÁLISES PELO MÉTODO DE MICHAELIS DA CONCENTRAÇÃO DE SUBSTRATO NECESSÁRIO PARA SATURAR AS ENZIMAS. PODEMOS VERIFICAR NO GRÁFICO QUE O VALOR DA VELOCIDADE MÁXIMA 4,66; E O KM É OBTIDO KM = Vmáx /2 .

RESULTADOS

Lineweaver Burk