Reprodução

Microscopia de luz

• Absorção e refração sãoimportantes na formação de imagens no microscópio;

[pic 1]

São consequências da interação da frente de onda com os componentes do material a ser analisado;

• Componentes ópticos do microscópio: fonte de luz,lente condensadora, lentes objetivas,lente ocular;
• Componentes mecânicos:base, braço, platina, parafusos macrométrico e micrométrico, revólver e canhão da ocular;
• A imagem final, em um microscópio, é invertida;
• Poder de resolução e limite de resolução são grandezas inversamente proporcionais;[pic 2]

Caracterizam a distância mínima entre 2 pontos distintos do objeto, os quais podem ser individualizados na imagem final;

• Iluminação de Kohler:centralização do feixe luminoso;[pic 3]

< ocorrência de aberrações e irregularidades no trajeto luminoso;

Microscopia de contraste de fase

• O caminho do feixe luminoso, na formação da imagem, sofre um retardo óptico, permitindo que materiais biológicos sejam observados sem coloração;
• É utilizado para análise de materiais sem coloração como:exames rápidos de culturas de células, esfregaços vaginais, sangue, bactérias, algas, protozoários de ambientes aquáticos. Na área ambiental, é importante para análise de conteúdo estomacal de animais;

Microscopia de contraste interferencial

• A mais difundida é a microscopia de Normarski;[pic 4]

Trabalha com a defasagem dos comprimentos de onda;

• Essa defasagem gera uma deformação, que permite contraste interferencial, gerando aumento do relevo da superfície do material a ser analisado;
• Permite a observaçãode materiais sem coloração;
• Usado nos monitoramentos de culturas celulares, e em parasitologia, no estudo da morfologia e taxonomia de pequenas larvas, ácaros e outros ectoparasitas;

Microscopia de polarização

• Nesse tipo de microscopia há a seleção de apenas um plano de direção de vibração da onda luminosa;[pic 5]

PLANO DA LUZ POLARIZADA (PPL)

• Trabalha com anisotropias ópticas como:dicroísmo e birrefrigência;
• Os componentes macromoleculares birrefrigentes (anisotrópicos) apresentam brilho sob o efeito do PPL e os ñ-birrefrigentes (isotrópicos) ficam indistintos em um fundo escuro;
• Os materiais biológicos estudados são:cél. musculares estriadas, espermatozóides, paredes celulares, amido, colágeno e DNA;

• A observação e a medida das propriedades anisotrópicas são importantes p o diagnóstico de patologias e estabelecimento da ordem molecular durante os vários momentos da vida celular;

• A birrefrigência pode ser intensificada por alguns corantes:

• Xylidene ou Picrossírius[pic 6]

Com ele, a birrefrigência do colágeno é intensificada, resultando na exibição de cores de interferência que podem auxiliar na interpretação dos graus de agregação molecular e organização dele no tecido;

• Azul de Toluidina[pic 7]

Permite estudos de ordeme agregação molecular da cromatina e da matriz extracelular;

• Microscopia Eletrônica:

• Microscopia eletrônica de transmissão:

- O objeto tem que ser extremamente fino para permitir a passagem dos elétrons e então, a partir dessa interação, formar a imagem.

- Em linhas gerais funciona assim: os elétrons saem da fonte geradora de elétrons, são encaminhados para a lente condensadora dos feixes, a qual os direciona para o espécime. O padrão de transparência aos elétrons será ampliado subseqüentemente pelas lentes intermediária e projetora. As imagens são ampliadas pela lente projetora e projetadas sobre um anteparo fluorescente, uma chapa fotográfica ou um monitor de TV, para então poderem ser percebidas pela retina.

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