Elisa Teste Genético

Os métodos imunológicos desenvolvidos para quantificar a concentração de

antígenos e anticorpos, por apresentarem grande sensibilidade e especificidade,

tornaram-se técnicas padronizadas para pesquisa e aplicações clínicas. Entre

esses métodos, um dos mais usados é o ELISA (Enzyme-linked immuno sorbent

assay).

Nesse método, uma enzima, que reage com um substrato incolor para

produzir um produto colorido, é covalentemente ligada a um anticorpo específico

que reconhece um antígeno alvo. Se o antígeno estiver presente, o complexo

anticorpo-enzima irá ligar-se a ele e a enzima catalisará a reação. Então, a

presença de produto colorido indica a presença de antígeno. Trata-se de um

método eficiente pois permite detectar quantidades de proteína da ordem de

nanogramas (10-9

g).

No ELISA, deve-se selecionar um par de anticorpos, que podem ser

monoclonais ou policlonais. O uso de anticorpos monoclonais resulta em maior

especificidade.

Dentre os diversos tipos de ELISA, destaca-se o ELISA SANDUÍCHE.

Nesse método, o anticorpo de um antígeno particular é, inicialmente, adsorvido no

well. Depois, o antígeno (soro, urina ou outra solução contendo o antígeno) é

adicionado e se liga ao anticorpo. Finalmente, um segundo e diferente anticorpo

ligado à enzima é adicionado. Nesse caso, a intensidade da reação é proporcional

à quantidade de antígeno presente. Logo, permite mensurar até pequenas

quantidades de antígeno.

Quanto ao método de revelação, pode ser direto ou indireto. No primeiro, a

enzima reveladora encontra-se ligada diretamente ao segundo anticorpo,

enquanto no indireto, a enzima apresenta-se ligada a um anti-anticorpo.

[After R. A. Goldsby, T. J. Kindt, B. A. Osborne, Kuby Immunology, 4th ed. (