DETERMINAÇÃO DE ETANOL EM SANGUE

UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALFENAS – UNIFAL-MG

MARIA PAULA DE SOUZA E SILVA

RAFAELA SCALCO FERREIRA

DETERMINAÇÃO DE ETANOL EM SANGUE

ALFENAS-MG

2012

---

1. FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA

A determinação de etanol em sangue é uma das análises mais freqüentes e importantes realizadas pelos laboratórios de toxicologia clínica e forense.

O etanol é uma das substancias químicas mais consumidas no mundo e é considerada um problema de saúde publica, principalmente em virtude das conseqüências negativas que pode acarretar.

O etanol é rapidamente absorvido e tem a concentração plamatica máxima atingida em cerca de 30 e 90 minutos. Grande parte do etanol ingerido é oxidado, sobretudo no fígado pela álcool desidrogenase (ADH), catalase e sistema de oxidação microssômica do etanol.

Existem inúmeras finalidades para a detecção de etanol tanto para pesquisas como para pratica clinica, âmbito forense, monitorização do uso de etanol no ambiente ocupacional e em outras situações onde o consumo de álcool é inadequado, como gravidez, crianças e adolescentes expostos e programas de controle e prevenção do uso de álcool.

A forma mais usual para a determinação de etanol e compostos relacionados em fluidos biológicos é pela cromatografia gasosa com amostragem por headspace estático associada a detectores de ionização em chama. O método se baseia na separação do etanol por um aumento na temperatura, tempo e compartimento fechado a qual substâncias voláteis se deslocam da matriz para o espaço de gás disponível. Após, o gás é injetado no cromatógrafo permitindo a separação das amostras voláteis presentes na amostra.

A destilação também pode ser aplicada para determinar etanol. Este método baseia-se na adição de excesso dicromato de potássio que reage com etanol formando ácido carboxílico. O excesso de dicromato reage com iodeto de potássio formando iodo, este por sua vez, é titulado com Na2S2O3. Lembrando que na titulação do branco um volume maior de Na2S2O3, já que não há etanol para reagir com o dicromato de potássio, o que faz com que mais iodo seja formado e titulado.

1. DESCRIÇÃO DO MÉTODO

Primeiramente, realizou-se a determinação de etanol em sangue por meio da titulação. Para isso, transferiu-se 5 mL de sangue para o balão de destilação e adicionou-se 40 mL de água destilada e 40 mL de solução saturada de ácido pícrico e algumas esferas de vidro. A seguir, realizou-se a destilação recolhendo-se 20 mL do destilado em uma proveta graduada. Transferiu-se 1 mL do destilado para o erlenmeyer com rolha esmerilhada e adicionou-se 2 mL de solução nitrocrômica. Aguardou-se 10 minutos e em seguida, adicionou-se 25 mL de água destilada e 10 mL de solução de KI 1%. Após 1 minuto, titulou-se o iodo liberado com solução de Na2S2O3, usando 0,5 mL de goma de amido como indicador. Acompanhou-se a determinação com branco de reativos. O volume gasto na titulação da amostra e do branco será utilizado para realização dos cálculos necessários para determinar a concentração de etanol em sangue.

O segundo procedimento realizado foi a determinação do etanol por headspce/ cromatografia gasosa. Colocou-se no frasco apropriado, 0,5 mL de solução de butanol 1,0 g/L, que corresponde ao padrão interno. Em seguida, adicionou-se 0,5 mL da amostra (sangue total), lavando a ponteira nessa solução e ao mesmo tempo homogeneizando a mistura. Os frascos foram fechados com tampa de borracha e com lacre de alumínio e depois, foram colocados em estufa na temperatura de 80 º C durante 10 minutos. As amostras devem permanecer na estufa até adquirirem o aspecto marron achocolatado. Decorrido os 10 minutos, retirou-se os frascos e com auxílio de uma seringa, introduziu-se a agulha na tampa de borracha e aspirou-se 0,1 mL do vapor e injetou-se rapidamente no cromatógrafo.

1. RESULTADOS

• Determinação de etanol em sangue por titulação

A concentração de etanol em sangue é calculada pela equação abaixo:

[pic 1]

sendo:

a: volume (mL) gasto para titular a amostra;

b: volume (mL) gasto para titular o branco;

va: volume da amostra (mL);

vd: volume do destilado;

0,115: equivalente, em mg de etanol a 1 mL da solução de Na2S2O3 0,01N

[pic 2]

                         Concentração de etanol = 2,07 g etanol/ L de sangue

• Determinação de etanol em sangue por cromatografia gasosa

Tabela 1: Valores das áreas de etanol, butanol, relação etanol/butanol, média e desvio padrão dos padrões.

Concentração		Etanol	Butanol	Etanol/Butanol	Média	Desvio Padrão
0,2 g/L	1ª leitura	146,156	2010,026	0,072713487	0,072273	0,000622761
2ª leitura	101,603	1414,438	0,07183277
0,5 g/L	1ª leitura	343,683	1824,885	0,18833132	0,179487	0,012508367
2ª leitura	82,184	481,617	0,170641817
1,0 g/L	1ª leitura	1036,204	2045,442	0,506591729	0,496214	0,014676922
2ª leitura	255,067	525,007	0,485835427
2,0 g/L	1ª leitura	2528,46	2708,39	0,933565698	0,883448	0,070877748
2ª leitura	1883,617	2260,351	0,833329425
3,0 g/L	1ª leitura	2088,855	1741,375	1,199543464	1,275811	0,107858491
2ª leitura	3170,129	2344,634	1,352078405
4,0 g/L	1ª leitura	875,732	572,634	1,529304931	1,640686	0,157516668
2ª leitura	254,486	145,249	1,75206714