Questões para estudo III – SNC e SNA
Por: RayssahAndrade • 13/5/2015 • Trabalho acadêmico • 3.947 Palavras (16 Páginas) • 275 Visualizações
RAYSSA BERNARDES ANDRADE
RELATÓRIO DE BACTERIOLOGIA
FRANCA
2015
COLORAÇÃO DE GRAM
INTRODUÇÃO
Coloração é a suspensão de células anexadas à lâmina como um filme, usualmente pelo calor. Os microbiologistas usam técnicas de coloração para mostrar as várias estruturas dos micro organismos, para identificar suas estruturas internas e para ajudar a identificar e separar micro organismos similares. É para a diferenciação de micro organismos através das cores para serem observados em microscopia ótica. Uma das principais técnicas é a coloração de Gram, sendo assim coradas e classificadas em: Gram-positivas (cristal violeta) e Gram-negativas (safranina). A razão da diferente coloração entre uma e outra está relacionada na espessura e estrutura de suas paredes celulares e também devido à sua resistência ao descoramento pelo álcool.
Preparação de esfregaço e coloração de Gram
As Gram-negativas possuem uma parede celular complexa e composta de peptideoglicano e se dividem em subgrupos conforme suas características morfológicas e fisiológicas, tais como motilidade e necessidade de oxigênio.
-OBJETIVO
Saber a preparar o esfregaço de bactérias e assim realizando a técnica de coloração de Gram,
-MATERIAIS
lâmina lugol
bico de bunsen água
corante (fucsina e cristal violeta) álcool acetona
pipeta de Pasteur microscópio óptico
-PROCEDIMENTO
Iniciamos com a fixação do esfregaço, passamos 3 vezes a lâmina no bico de bunsen logo cobrimos a lâmina com cristal violeta por 1 minuto, escorremos o excesso e cobrimos a lâmina com lugol, em seguida lavamos em água corrente, adicionamos a solução álcool-acetona para a descoração e novamente lavamos em água corrente, cobrimos com o corante fucsina durante 30 s e por fim lavamos em água, deixamos secar e observamos em microscopia otica com óleo de imersão para melhor visualização na objetiva de 100x.
-RESULTADOS
[pic 1]
COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN
Coloração de bactérias álcool-ácido resistentes (Ziehl-Neelsen)
É o método de coloração especial para bactérias ácido-resistentes, que se refere a bactérias capazes de resistir muitas substâncias químicas.
-OBJETIVO
Usado em laboratórios para o diagnóstico de micobacterioses
MATERIAIS
lâmina
corante (fucsina e azul de metileno)
álcool-ácido clorídrico
-PROCEDIMENTO
Fizemos um esfregaço com a Mycobacterium e fixamos no calor, após coramos com o corante fucsina e em seguida aquecemos cuidadosamente a lâmina até emissão de vapores durante 5 min, escorremos o excesso do corante e diferenciamos com álcool-ácido clorídrico a 1%, lavamos com água corrente delicadamente, depois coramos novamente com o corante azul de metileno por 30 s, lavamos com água corrente e deixamos a lâmina secar, observamos em objetiva no óleo de imersão no aumento de 100x.
-RESULTADO
Formação de bacilos rosa, encontra-se bacilos corados em rosa
COLORAÇÃO DE PAREDE – MÉTODO DE ROBINOW
Coloração de Parede (Método Robinow)
A parede celular bacteriana é uma estrutura rígida que recobre a membrana citoplasmática e confere a forma de bactérias
-OBJETIVO
Observar e identificar a lâmina para chegar aos resultados
-MATERIAIS
lâmina
solução ácido tônico
água
-PROCEDIMENTO
Fizemos um esfregaço em lâmina com o Bacillus Megaterium em seguida deixamos secar, mergulhamos a lâmina em solução de ácido tônico (sol. A) durante 20 min, lavamos em água corrente e deixamos secar e logo após observamos em objetiva no óleo de imersão no aumento de 100x.
COLORAÇÃO FONTANA TRIBONDEAUX
3*Método de impregnação pela prata de bactérias espiraladas (Fontana- Tribondeaux)
Trata-se de uma técnica de impreguinação pela prata
-OBJETIVO
-MATERIAIS
palito de dente solução impregnadora (solução c)
lâmina líquido de rouge
água mordenças com solução b
-PROCEDIMENTO
Usamos um palito de dente e colhemos a amostra e fizemos um esfregaço em seguida deixamos secar e fixamos o esfregaço em líquido rouge durante um min, após lavamos cuidadosamente mordenças com solução b, aquecemos até emissão de vapor lavamos novamente em água corrente e destilada colorimos com solução impregnadora (solução c)e aquecemos até emissão de vapor durante 30 s, lavamos e deixamos secar e assim observamos em objetiva no óleo de imersão no aumento de 100x.
COLORAÇÃO DE WIRTZ - CONKLIN
Coloração de esporos (Método de Wirtz- Conklin)
É uma célula de parede espessa,composta por peptideoglicano, a qual vai dar origem à parede da célula vegetativa, por ocasião da germinação é muito resistente ao calor, á dessecação e outros agentes químicos e físicos, permanecendo latente por um longo período.
-OBJETIVO
Indagar e cumprir a coloração de esporos e compreender a princípio a técnica.
-MATERIAIS
lâmina água
bico de bunsen microscópio óptico
corante (verde malaquita e safranina)
-PROCEDIMENTO
Foi feito um esfregaço fino com Bacillus Megaterium, deixamos secar e em seguida fixamos a lâmina no calor, cobrimos o esfregaço com o corante verde malaquita e aquecemos a lâmina até desprendimento de vapor com 2 min, depois lavamos em água corrente e cobrimos o esfregaço com o corante safranina com 1 min e após lavamos em água corrente e logo deixamos secar e observamos em objetiva de imersão no aumento de 100x.
COLORAÇÃO METODO DE GINS
Coloração de Cápsula (método de Gins)
A cápsula é uma camada gelatinosa externa composta de polissacarídeos, glicoproteínas ou polipeptideos produzidas por algumas bactérias e que envolve a parede celular patogenicidade humana.
-OBJETIVO
Identificar a morfologia .
-MATERIAIS
lâmina crescimento de bactéria
corante (fucsina e eosina)
bico de bunsen
-PROCEDIMENTO
Iniciamos com uma gota de corante fucsina a 1% na lâmina, misturamos uma alçada do crescimento de klebsiella pneumoniae e sem espalhar a gota deixamos em reparo durante 30 s e após acrescentamos uma gota de corante eosina a 1% e homogenizamos 1 min, fizemos o esfregaço com o auxílio de outra lâmina e deixamos secar logo observamos em objetiva no óleo de imersão no aumento de 100x.
SEMEADURA DE FEZES E URINA
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