Teste Imunológicos

DESENVOLVIDO POR:

Ana Paula Oliveira, Fernanda Oliveira, Jaciel Araújo, Janine Oliveira, Paloma Silva e Yara Corrêa

NOTAS

Por favor, leia atentamente as instruções antes de usar.

-Somente para diagnóstico in vitro (não usar internamente).

-Não use o dispositivo do teste após a data de validade, impressa no sachê laminado do teste.

-Conservar em local seco. Manter em temperatura ambiente (2ºC~30ºC)

Não congelar.

-Manter fora do alcance de crianças.

USO

O POWER-TEST é um teste rápido de diagnóstico in vitro imunocromatográfico, desenvolvido pela equipe de prática 6 do Laboratório da FACICA, foi elaborado para determinação qualitativa de anticorpos contra HIV 1/2 em sangue total por punção digital. As amostras reativas devem ser confirmadas por um teste complementar.

O VÍRUS HIV

Os vírus da imunodeficiência humana (HIV-1 e HIV-2) são Retrovírus

pertencentes à família dos Lentivírus. Esta família inclui vírus capazes de provocar infecções com longos períodos de latência. Por isso, produzem degeneração lenta e progressiva do sistema imune.

O vírus possui:

Uma camada mais externa, o envelope, que contém lipídeos e

proteínas. As proteínas virais encontradas são as glicoproteínas 120

(gp 120) e as 41 (gp 41). A gp 120 é a mais externa e é a responsável

pela ligação do vírus com as células hospedeiras. Ela também está

ligada a outra proteína, a gp 41, que atravessa o envelope viral.

Na parte interna do envelope viral existe outra camada proteica

constituída da proteína 17 .

A estrutura seguinte é o cerne ou núcleo-capsídeo viral constituído

por uma camada de proteínas p24 que recobre duas fitas de RNA

(genoma viral) e as enzimas transcriptase reversa, integrase e

Protease)

Infecção das células humanas pelo HIV

O HIV infecta células que possuem receptores do tipo CD4+ na

sua superfície como, por exemplo, os linfócitos T helper (T auxiliar), os

macrófagos e as células dendríticas. Essas células participam ativamente na defesa do organismo contra agentes infecciosos.

PRINCÍPIO DO TESTE

O dispositivo de teste POWER-TEST contém uma tira de membrana, que é pré-revestida com três proteínas recombinantes de HIV especialmente selecionadas (p24, gp41 de HIV1, gp36 de HIV 2) estas proteínas encontram-se na fase estacionária. Isto permite que o teste POWER-TEST detecte anticorpos contra HIV 1/2 em amostra de sangue total, estes por sua vez representam a fase móvel, por punção digital com um elevado grau de precisão. A mistura de antígenos ouro coloidal recombinantes, amostra do paciente e solução tampão que se move cromatograficamente através da membrana para a região de teste, forma uma linha visível na região de teste (T) indicando um resultado positivo para a detecção de anticorpos específicos de HIV 1/2. Quando os anticorpos específicos de HIV 1/2 estão ausentes na amostra, nenhuma cor visível na região da banda de teste aparecerá, aparecendo apenas uma banda na região do controle.

MATERIAIS FORNECIDOS

O kit do teste POWER-TEST contém os seguintes itens para realizar o ensaio:

- Dispositivo POWER-TEST

- Frasco de solução tampão.

ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE DO KIT

O teste POWER-TEST pode ser estocado à temperatura ambiente até 30ºC. O teste é sensível à umidade e também ao calor. Realizar o teste imediatamente após retirar o dispositivo do envelope de alumínio. Não utilizar além do prazo de validade.

INSTRUÇÃO DE PROCEDIMENTO DO POWER TEST

- Remova o dispositivo de teste do envelope de alumínio e o coloque em uma superfície plana e seca

- Limpe o dedo com álcool e espere secar.

-Pegue a lanceta estéril, gire delicadamente em sentido horário a extremidade branca, retirando a tampa.

- Posicione a extremidade destampada da lanceta, ligeiramente fora do centro da ponta do dedo anelar e a pressione contra o dedo para fazer uma punção na pele e o dedo sangrar. Evite apertar o dedo para fazê-lo sangrar

-Pegue o dispositivo de coleta de amostra (tubo capilar) e encoste a extremidade marcada com linhas azul e vermelho sobre a gota de sangue formada em seu dedo. Faça com que o tubo capilar seja preenchido com a amostra de sangue do seu dedo até a marcação em azul (10µL)

Não demorar mais que 1 minuto para que o sangue não coagule.

Despejar o sangue contido no tubo capilar no poço de amostra (S) do dispositivo de teste. Basta encostar a extremidade que contém a amostra de sangue na membrana absorvente contida dentro do poço de amostra do dispositivo de teste. O sangue será absorvido naturalmente.

Adicionar 3 gotas de solução tampão no mesmo poço de amostra.

O resultado deve ser interpretado após os 10 primeiros minutos e até no máximo 20 minutos.

PRECAUÇÕES

Anticoagulantes como heparina, EDTA, e citrato não afetam o resultado. Interferentes relevantes conhecidos como amostras hemolíticas, fator reumatoide, amostras