A Anatomia Vegetal

Roteiro de Aula Prática Biologia Celular – Agronomia                Ass. Profª.:______________
Acadêmico:_______________________________________________Data:___________________

Extração de DNA de células vegetais

Objetivos: (1) Processar a extração de DNA de amostras vegetais; (2) Verificar a existência de
moléculas de DNA em amostra de vegetais através da visualização a olho nu.
Materiais:
3 cebolas grandes Sacos plásticos 3 facas Álcool etílico 95%
gelado
4 bananas Sal 2 béquer de 250 ml Suporte para funil
8 morangos Água deionizada 2 provetas de 100
ml
Funil grande
Banho de gelo 2 bastões de vidro 1 proveta de 10 ml Vidro relógio
grande
Gaze 1 almofariz/pistilo Detergente 4 tubos de ensaio
grande
Procedimentos:
Parte 1: Extração de DNA de cebola
a) Picar uma cebola grande em pedaços quadrados de aproximadamente 5 mm.
b) Tarar um vidro relógio. Pesar 3 g de sal.
c) Medir, com o auxílio de uma proveta, 10 ml de detergente.
d) Transferir o sal e o detergente a um béquer de 250 ml.
e) Adicionar a este béquer 90 ml de água. Mexer bem com um bastão de vidro.
f) Adicionar a esta solução a cebola picada
g) Levar o béquer com a solução para aquecer em banho-maria a 60º C por 15 minutos
h) Discorrido o tempo, esfriar rapidamente a solução em uma bacia com gelo por 5 minutos
i) Montar o funil no suporte. Coar a mistura em um papel de filtro
j) Jogar fora o ‘bagaço’ e distribuir o líquido filtrado em 4 tubos de ensaio grande
k) Verter delicadamente, pelas bordas do tubo de ensaio, 2 ml de álcool etílico 95% gelado
l) Verificar que o DNA “sobe” para o etanol, no qual não é solúvel, ficando preservado
m) Anotar e esquematizar os resultados.

Pesquisar:
1) Por que o material precisa ser macerado para isolar o DNA?
2) Qual o papel do detergente presente no processo de extração do DNA?
3) De que é composta a molécula de DNA?
4) Visto que o DNA não é solúvel em álcool, o que ocorre com suas moléculas quando
colocadas neste meio?[pic 1]

...