Função dos reagentes usados na extracção do DNA

Parte experimental

Material

• Bananas

• Agua

• Sal de cozinha

• Detergente de lavar loiça

• Álcool etílico a 95% (colocado no congelador a -20ºC)

• Fucsina

• Liquidificador

• Gobelés

• Bisturi

• Funil

• Papel de filtro

• Palitos

Procedimento

1. Descascar duas bananas, corta-se em fragmentos e coloca-se no liquidificador

2. Colocar 200ml de agua num gobelé, adiciona-se uma colher de sal e mistura-se.

3. Colocar esta solução no liquidificador

4. Misturar no liquidificador á velocidade máxima durante 10 segundos.

5. Usando o papel de filtro e o funil, filtre a mistura resultante para um gobelé.

6. Misture, ao filtrado, lentamente para não fazer bolhas, três colheres de chá de detergente.

7. Adicione 150ml de álcool etílico, lentamente, fazendo-o escorrer pelas paredes do gobelé. Não misture o álcool com a solução, de modo a que este permaneça como uma camada isolada no topo da solução.

8. Aguarde 5 minutos.

9. Observe e verificará que filamentos de cor branca – DNA e proteínas – se precipitam no limite da camada de álcool (pode, com um palito, retirar estes filamentos de DNA, colocá-los num meio com álcool, a -20ºC, durante longos períodos de tempo).

10. Coloque 3 gotas de fucsina** e observe o sucedido.

• * Poderá ser substituído por um almofariz ou varinha mágica.

• * * A fucsina é um indicador da presença de DNA, adquirindo este a tonalidade vermelha na sua presença.

Resultados

Ao derramar-mos o álcool e começou-se a notar-se umas fitas brancas muito finas de DNA, mas como não eram bem visíveis deixamos repousar durante um intervalo de 20minutos.

As células tiveram de ser bem esmagadas para conseguirmos o maior número possível das mesmas. Ao esmagar a banana, quebram-se ligações, mas se esmagarmos demasiado, isso faz com que danifiquemos o seu DNA

fig1- DNA com/sem fucsina

Discussão

Função dos reagentes usados na extracção do DNA:

O sal:

Empregamos sal para ajudar a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído, impedindo que elas precipitem com o DNA. O sal também dá um ambiente favorável ao DNA, e contribui com iões positivos que neutralizam a carga negativa.

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