A Aula Histologia Básica
Por: Baú da Lu • 1/4/2017 • Abstract • 327 Palavras (2 Páginas) • 673 Visualizações
MÉTODOS DE ESTUDO EM HISTOLOGIA
1- Microscopia
-Microscópio Óptico (Luz) e suas variações:
-Microscópio de Polarização;
-Microscópio de Contraste de fase;
-Microscópio Confocal e de Fluorescência;
-Microscópio Invertido;
-Microscópio Eletrônico de Transmissão;
-Microscópio Eletrônico de Varredura
2- Microscópio Óptico
- A luz é concentrada no condensador, atravessa o espécime sobre a platina, passa pelas lentes da objetiva e da ocular, chegando ao olho do observador como uma imagem ampliada.
- Análise no microscópio: necessidade de cortes ultrafinos
3- Processamento Histológico: Microscopia de Luz
- Fixação
- Descalcificação*
- Desidratação
- Clareamento
- Inclusão
- Microtomia
- Reidratação
- Coloração
4- Fixação: finalidades
- Evitar a digestão tecidual por enzimas próprias ou de bactérias;
- Endurecer os fragmentos teciduais;
- Preservar a estrutura e a composição molecular dos tecidos.
- Fixadores mais utilizados:
Formaldeído 4%
Glutaraldeído + tetróxido de ósmio (ME)
5- Descalcificação e Desidratação
- Descalcificação: para tecidos duros
Retirada de minerais
Geralmente em soluções ácidas
- Desidratação: concentrações crescentes de etanol
6- Clareamento
- Xilol: solvente orgânico, miscível tanto em etanol quanto em parafina.
- Os tecidos ficam transparentes ou translúcidos
7- Inclusão
-Colocar o espécime em blocos de parafina ou resina
8- Microtomia
-“Fatiar” o bloco de inclusão
-Cortes histológicos
9- Coloração
Hematoxilina: cora substâncias ácidas, como núcleo, REG, matriz da cartilagem hialina
Eosina: cora substâncias básicas, como a maior parte do citoplasma: mitocôndrias, ptnas citoplasmáticas, colágeno, grânulos de secreção
10- Microscopia eletrônica de Transmissão
- Feixe de elétrons atravessa o corte
- Imagens em preto e branco
11- Microscopia eletrônica de Varredura
- Feixe de elétrons não atravessa o corte
12- Cultura de células
13- Imunohistoquímica
- Técnica direta: uso de anticorpo primário
- Técnica indireta: uso de anticorpo primário e secundário
- A mais usada é a indireta, associada ao complexo avidina-biotina-enzima.
- O complexo é formado pela ligação de uma molécula de strepto-avidina com várias de biotina associadas a uma enzima (peroxidase ou fosfatase alcalina),
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