Análise dos resultados
Por: Catarina Rolo • 28/5/2019 • Relatório de pesquisa • 624 Palavras (3 Páginas) • 271 Visualizações
Análise dos resultados
- Determinação da concentração de proteína pelo método de Lowry
- Determinação das quantidades de proteína;
- Construa a curva de calibração representando a absorvância medida em função da quantidade de proteína padrão (μg);
[pic 1]
[BSA] = 0,43 mg/mL = 0,43 µg/ µL
𝑚1 = 0,43 × 0 = 0 µg
𝑚2 = 0,43 × 40 = 17,2 µg
𝑚3 = 0,43 × 80 = 34,4 µg
𝑚4 = 0,43 × 120 = 51,6 µg
𝑚5 = 0,43 × 160 = 68,8 µg
𝑚6 = 0,43 × 200 = 86 µg
Quantidade de Proteína (µg) | Absorvância (680nm) | Média (Abs.) | ||
1 | 0 | 0,091 | 0,051 | 0,071 |
2 | 17,2 | 0,229 | 0,173 | 0,201* |
3 | 34,4 | 0,212 | 0,241 | 0,2265 |
4 | 51,6 | 0,363 | 0,328 | 0,3455 |
5 | 68,8 | 0,374 | 0,416 | 0,395 |
6 | 86 | 0,474 | 0,523 | 0,4985 |
[pic 2]
*Valor retirado de modo a obter uma curva de calibração mais precisa
[pic 3]
[pic 4]
[pic 5]
Y - Absorvância | X - Quantidade de proteína (µg) | |
1 | 0,091 | 0 |
2* | ||
3 | 0,212 | 34,4 |
4 | 0,363 | 51,6 |
5 | 0,374 | 68,8 |
6 | 0,474 | 86 |
1 | 0,051 | 0 |
2 | 0,173 | 17,2 |
3 | 0,241 | 34,4 |
4 | 0,328 | 51,6 |
5 | 0,416 | 68,8 |
6 | 0,523 | 86 |
*Linha eliminada de modo a obter uma curva de calibração mais precisa
[pic 6]
[pic 7]
- Determine a concentração (μg/mL) de proteína nas amostras de gelatina e de citocromo c de fermento de padeiro.
- Determinação da concentração molar de citocromo c de fermento de padeiro na amostra fornecida:
Determinação da curva de calibração mais adequada:
Depois de esboçadas as curvas de calibração respetivas às tabelas 1 e 2 (gráfico 1 e 2, respetivamente), decidiu-se que a equação mais adequada para se trabalhar correspondia à equação da curva de calibração do gráfico 1, visto que apresentava o índice de dispersão (R²) mais próximo da unidade, ou seja, uma menor dispersão de valores. Assim todos os cálculos que se seguem, têm por base a equação: y = 0,0049x + 0,069;
Deste modo, rescrevendo a equação em ordem à quantidade de proteína (X), obtivemos:
X = (Y – 0,069)/0,0049[Proteínan]
Quantidade de proteína X (µg) | Absorvância Y | |||||
Animal | 120,408 | 114,897 | 184,0811 | 0,659 | 0,632 | 0,9711 |
Vegetal | 11,428 | 84,08122 | 83,06122 | 0,125 | 0,4812 | 0,4762 |
Citocromo C | 74,897 | 80 | 83,061 | 0,436 | 0,461 | 0,476 |
Tabela 1 - valores de massa de proteína obtidos a partir da equação y = 0,0049x + 0,069
- Os valores destacados da gelatina animal apresentam uma discrepância relativamente aos restantes ensaios desta gelatina, portanto foram descartados na realização dos cálculos.
- Os valores destacados para a gelatina vegetal apresentavam valores muito próximos dos valores da gelatina animal pelo que optamos excluí-los, para tal baseámo-nos no conhecimento teórico que indica que o expectável seria uma quantidade de proteína substancialmente maior na gelatina animal, comparativamente à vegetal.
Determinação da concentração mássica de cada proteína:
(µg/ml) [pic 8]
Volume Pipetado: 0,200 ml
Determinação da concentração molar de citocromo c de fermento de padeiro na amostra fornecida:
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