DOSAGEM DO COLESTEROL TOTAL

AULA PRÁTICA 2: DOSAGEM DO COLESTEROL TOTAL

CASCAVEL – PR

13/03/2012

DOSAGEM DO COLESTEROL TOTAL

MÉTODO: Enzimático de Trinder

PRINCIPIO DO METODO:

O colesterol é determinado através dos ésteres de colesterol que são hidrolisados pelo colesterol esterase a colesterol livre e ácido graxos. O colesterol livre é oxidado pelo colesterol oxidase a colest-4-em-ona e peróxido de hidrogênio. Na presença de peroxidase e peróxido de hidrogênio, o fenol e a 4-aminoantipirina são oxidados formando a antipirilquinonimina que tem absortividade máxima em 500 nm.

A intensidade da cor vermelha formada na reação final é diretamente proporcional a concentração do colesterol na amostra.

MATERIAL DE CONTROLE:

 Multicalibrador (142 mg/ dL) – Trucal Lote: 12000

 Soro controle (160 mg/dL) – TrulaB: N 14006

PROTOCOLO UTILIZADO:

PROCEDIMENTO:

Foram utilizados três tubos de ensaio e em cada um dos tubos foi procedido da seguinte maneira:

BRANCO MULTICALIBRADOR SORO CONTROLE AMOSTRA

REAGENTE 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL

MULTICALIBRADOR --------- 10 µL ---------- -----------

SORO CONTROLE --------- ----------- 10 µL -----------

AMOSTRA --------- ----------- ---------- 10 µL

Em seguida os tubos de ensaio foram homogeneizados e incubados em banho-maria a 37°C durante 10 minutos. Depois de retirados foram determinados suas absorbâncias em espectrofotômetro a 500 nm.

RESULTADOS:

Leituras das absorbâncias:

MULTICALIBRADOR: 0,257 nm

SORO CONTROLE: 0,266 nm

AMOSTRA: 0,136 nm

CÁLCULOS:

Fator de correção: Concentração do multicalibrador / Absorbância do multicalibrador

Fator de correção: 142 /0,257= 552,529

Colesterol (mg/dL)= Fator de correção x Absorbância da amostra

Colesterol (mg/dL)= 552,529 x 0,136= 75,14 mg/dL

Soro controle (mg/dL)= Fator de correção x Absorbância do soro controle

Soro controle (mg/dL)= 552,529 x 0,266= 146,97 mg/dL