Método Alternativo Do Olho Isolado De Galinha -

Método Alternativo – Teste do Olho Isolado da Galinha (ICE)

Teste de Draize - É utilizado para medir a ação nociva dos ingredientes químicos encontrados em produtos de limpeza e em cosméticos.

1938 – Grande número de casos de cegueira (rímel);

John H. Draize e Jacob M. Spines;

Reconhecido em 1944, nomeado em 1963;

Coelhos são os mais usados;

Kirk Wilhelmus, professor do departamento de oftalmologia da faculdade Baylor de medicina (Houston, Texas, US), fez uma revisão do teste.

“Os olhos dos coelhos são mais suscetíveis a irritação de substâncias químicas do que os olhos humanos.”

HSI – Humane Society International - Ong contra a utilização de animais em experimentos de cosméticos e produtos de limpeza.

ICE – Isolated Chicken Eye

Objetivo: avaliar quantitativamente o potencial irritante de um ingrediente após aplicação sobre o olho isolado de galinha, levando em conta:

Inchaço da córnea

Retenção por fluoresceína

Opacidade

Princípios do teste:

Modelo organotípico;

Tempo reduzido de permanência in vitro;

Lesão determinada por: opacidade, inchaço da córnea e retenção da fluoresceína;

Os olhos saudáveis das galinhas são coletados de um abatedouro (7 semanas de vida, 1.5-2.5kg);

A cabeça da galinha deve ser removida imediatamente após a sedação (choque elétrico);

O transporte deve ser realizado de maneira rápida: mínimo de 2 horas, temperatura de 18°C – 25°C;

Todos olhos coletados para o experimento devem ser do mesmo grupo em um dia específico;

Preparação dos olhos:

1. Pálpebras são cortadas com cuidado para não danificar a córnea;

2. Integridade da córnea é avaliada com fluoresceína e

analisada no slit-lamp;

3. O nervo óptico deve ser deixado intacto, porém a membrana

e outros tecidos são retirados. Após remoção é colocado em

uma gaze úmida;

4. O olho é colocado em aparato com uma pinça anti-oxidável na posição vertical, enquanto a córnea é suprida com solução salina (3-4 gotas/min) á temperatura de 32°C;

5. Olhos examinados novamente (opacidade avaliada em um opacitômetro);

6. Se aprovados são incubados em média por 45-60 min;

7. Caso algum olho possua algum dano ele deve ser substituído.

DIAGRAMS OF THE ICE SUPERFUSION APPARATUS AND EYE CLAMPS

(See Burton et