PERMEAÇÃO DE ÁGUA E SOLUTOS EM HEMÁCIAS - HEMÓLISE

Centro Universitário de Patos de Minas – UNIPAM

Amanda de Melo da Silva

Erica Regina Valeriano Silva

Flávio Francisco Martins

Francielle Silva Costa

Franklin Tavares do Nascimento Neto

Janaina Torres Ramos Mendes

PERMEAÇÃO DE ÁGUA E SOLUTOS EM HEMÁCIAS – HEMÓLISE

Patos de Minas – MG, Fevereiro de 2014

Amanda de Melo da Silva

Erica Regina Valeriano Silva

Flávio Francisco Martins

Francielle Silva Costa

Franklin Tavares do Nascimento Neto

Janaina Torres Ramos Mendes

PERMEAÇÃO DE ÁGUA E SOLUTOS EM HEMÁCIAS – HEMÓLISE

Patos de Minas – MG, Fevereiro de 2014

Introdução - 2 -

Objetivo - 2 -

Materiais - 3 -

Métodos - 3 -

Resultados - 4 -

Discussão - 7 -

Conclusão - 9 -

Referências - 10 -

Introdução

As células são constituídas por citoplasma, núcleo e organelas. A membrana que envolve as células separa o interior da mesma do meio extracelular, esta membrana contém poros que permitem a passagem de substâncias. As hemácias são células anucleadas, constituídas apenas por membrana plasmática e citoplasma. Elas se encontram em equilíbrio osmótico com o meio extracelular, devido à circulação sanguínea e o transporte de oxigênio e energia (ATP), que é utilizado pelas ATPases Na+ e K+ da membrana, como fonte de energia para o bombeamento de Na+ do interior para o extracelular e K+ do meio extracelular para o intracelular. As hemácias originam se na medula óssea pela proliferação e maturação dos eritoblastos. As funções primordiais dos glóbulos vermelhos são a de transportar oxigênio dos pulmões par os tecidos, mantendo a perfusão tissular adequada, e transportar CO2 dos tecidos para os pulmões. A vida das hemácias é relativamente curta, entre 100 e 120 dias na circulação, sendo removidas e renovadas as hemácias velhas da circulação. As hemácias têm uma forma homogênea de corpúsculos circulares bicôncavos, e de tamanho relativamente uniforme; permitindo assim as hemácias variarem o volume, principalmente aumentar-no, sem que haja estiramento da membrana. Quando ultrapassado o volume crítico, a hemácia atinge uma forma esférica, atingindo aumentos subseqüentes de volume, acontecendo assim hemólise com liberação do conteúdo celular (hemoglobina) para o meio extracelular.

Objetivo

Demonstrar e ilustrar os seguintes aspectos relacionados com o movimento de água através da membrana celular:

a) osmose;

b) pressão osmótica;

c) equilíbrio;

d) osmolaridade;

e) fluxo de volume

f) coeficiente de reflexão.

Materiais

• Heparina ou oxalato de sódio (anticoagulante)

• Sangue

• Bastão de vidro

• Papel absorvente

• Estante para tubos de ensaio

• 18 tubos de ensaio de 15 ml

• Água destilada

• 8 pipetas cilíndricas de 10 ml

• Luvas

• Centrífuga

Soluções:

• NaCl - 150mM, 500mM e 100 mM

• Uréia - 300mM e 500 mM

• Sacarose - 300mM e 500 mM

• Cloreto de Amônio - 150 mM

Métodos

1- Colocou-se 2 mL de sangue humano e adicionou-se anticoagulante na concentração aproximada de Heparina: 0,2 mg/mL ou Oxalato de Na+: 1 a 2 mg/mL de sangue;

2- Preparou-se uma bateria de 11 tubos de ensaio contendo soluções na NaCl de concentrações decrescentes, obtidas por mistura de água a NaCl – 150 mM nas seguintes proporções em volume (ml): 0/10; 1/9; 2/8;... 9/1; 10/0. Homogeneizou-se a mistura por agitação;

3- Adicionou-se 80 µm de sangue (aproximadamente 3 a 4 gotas) a cada um dos tubos, cobriu-se os com o dedo polegar limpo e inverteu-se lentamente para misturar sem formação de espuma;

4- Centrifugou-se os tubos a 3000 rpm durante 3 minutos. Retiraram-se os cuidadosamente da centrífuga. Observou-se o aspecto do sobrenadante, o volume e o aspecto do sedimento. Descreveram-se os fatos observados, classificando-se e anotando-se os tubos de acordo com o aspecto das soluções.

Resultados

Para a obtenção dos resultados, utilizou-se de fórmulas já prontas que iriam auxiliar na determinação da concentração de NaCl em cada amostra, da osmolaridade e do valor da pressão osmótica (atm).

Para calcular-se a concentração usou-se a fórmula básica da regra de três, sabendo-se que na primeira