Tabela Com síntese Das Reação Para Identificação De Aminoácidos

7.0 - REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS

7.1 – INTRODUÇÃO:

Os aminoácidos são as unidades estruturais (monômeros) das proteínas. Estruturalmente, são definidos como pequenas biomoléculas formadas por um carbono central α (alfa) ligado a um g rupo carboxílico, um grupo amina, um hidrogênio e um radical R, que diferencia cada um dos aminoácidos.

Estrutura de um aminoácido

Embora centenas de aminoácidos sejam conhecidos, apenas 20 podem ser polimerizados para formar cadeias protéicas. Destes, 19 apresentam quatro ligantes diferentes em torno do carbono α, caracterizando -o como um carbono quiral e conferindo-lhes atividade óptica. Isso dá a esses aminoácidos a possibilidade de existir em duas formas isoméricas denominadas L ou D (levógero e dextrógero, respectivamente, segundo a convenção de Fisher). No entanto, por questões de especificidade enzimática no momento de sua síntese, os aminoácidos que compõem proteínas são todos L-aminoácidos, apresentando o grupo amino à esquerda do carbono α.

Os aminoácidos podem ser classificados quanto às características químicas de seus radicais. Embora existam algumas variações dessa classificação, as mais simples delas enquadra os radicais dos aminoácidos em quatro grandes grupos:

- Radicais polares, mas não carregados;

- radicais polares carregados positivamente;

- radicais polares carregados negativamente;

- radicais apolares.

7.2 – OBJETIVOS:

- Identificar a presença dos aminoácidos

7.3 - MATERIAIS E REAGENTES

• Tubos de ensaio;

• Pipetas de 1,0; 2,0 e 5,0 mL;

• Clara de ovo;

• Gelatina (sem sabor) a 2 %;

• Solução de NaOH a 2,5 mol/L; 6,0 mol/L e a 4 %;

• Solução de acetato de chumbo a 10 %;

• Reativo de Millon;

• Reativo de Hopkins Cole;

• Solução alcoólica de alfa-naftol a 0,4 %;

• Solução de hipoclorito de sódio a 6,0-7,0 %;

• Reativo de biureto;

• Solução de ninhidrina a 0,1 %;

• Ácido nítrico concentrado;

• Ácido sulfúrico concentrado;

• Ácido acético concentrado.

EXPERIMENTOS

1 - Reação de aminoácidos sulfurados

• Em tubos de ensaio distintos, foi colocado 1,0 mL da solução de clara de ovo e 1,0 mL da solução de gelatina.

• Adicione 1,0 mL de solução de NaOH a 6,0 mol/L. Aqueça os tubos em chama direta.

• Foram adicionadas três gotas de ácido acético concentrado e de acetato de chumbo a 10%.

Anotações dos resultados observados: No tubo que continha clara de ovo ouve mudança na coloração, este ficou pardo, já no tubo que continha geletina não ouve mudança aparecente.

2 - Reação de Millon

• Coloque 1,0 mL de solução de clara de ovo em um tubo de ensaio e 1,0 mL da

solução de gelatina em outro.

• Adicione 1,0 mL do reativo de Millon a cada um deles e foram aquecidos em

chama direta por 30 s.

• Observe o aparecimento de uma coloração vermelho tijolo.

• Os fenóis, quando aquecidos com sais mercuriais, formam derivados mercuriais que, em presença de HNO3, sofrem nitração, formando compostos de coloração vermelho tijolo. A tirosina é o único aminoácido encontrado em proteínas que contém grupo fenólico. Portanto, somente as proteínas que contém tirosina dão a reação de Millon positiva.

Anotações dos resultados observados: O tubo contendo solução de clara de ovo não apresentou mudança. Já o tubo contendo solução de gelatina apresentou coloração vermelho tijolo.

3- Reação de Hopkins-Cole

• Em tubos de ensaio distintos, coloque 1,0 mL da solução de clara de ovo e 1,0

mL da solução de gelatina.

• Acrescente 3,0 mL do reativo de Hopkins-Cole a cada um deles.

• Inclune os tubos e adicione 2,0 mL de ácido sulfúrico concentrado (20 gotas = 1,0 mL), deixando escorrer pela parede dos tubos. (Fazer na presença do professor)

• Aguardar alguns minutos e observar a formação de um anel violeta se houver a presença de triptofano na proteína.

• Na presença de ácidos, muitos aldeídos se condensam com o anel indólico do triptofano, formando compostos coloridos. Na reação de Hopkins-Cole, as proteínas que contém triptofano reagem com o ácido glioxílico (que contém um grupamento aldeídico ligado a uma carboxila) e, pela ação do H2SO4 concentrado, formam composto de cor violeta, na interface.

Anotações dos resultados observados: Houve uma mudança de coloração no tubo que continha clara de ovo, mostrando na reação duas fases e a ocorrencia da formação de um anel violeta. Já no tubo contendo solução de gelatina não ouve mudanças aparentes.

4- Reação de Sakagushi

• Em tubos de ensaio distintos, coloque 1,0 mL da solução de clara de ovo e 1,0 mL da solução de gelatina.

• Adicione 1,0 mL de NaOH 2,5 mol/L.

• Acrescente 0,5 mL de alfa-naftol a 0,4% e 1,0 mL da solução de hipoclorito de sódio.

• Os aminoácidos que contém produtos de substituição das guanidinas dão coloração vermelha quando tratadas com alfa-naftol e hipoclorito de sódio. É o caso das proteínas que contém arginina.

Anotações dos resultados observados: Ambos os tubos que continha