Aula Prática 4

Centro Universitário UniBH

Disciplina: Biorremediação

Professor: Dr. Leonardo de Paiva Barbosa

Curso: Engenharia Ambiental – 2014/2

Aula prática 04: Microscopia a Fresco

A observação direta dos microrganismos depende do uso de microscópios. Essa observação pode ser feita mediante o uso de corantes ou a fresco, sem coloração. A microscopia a fresco permite verificar viabilidade, tamanho, forma natural dos microrganismos e atividades celulares. A utilização do azul de metileno como corante permite verificar a viabilidade celular. Células coradas indicam que as células estão mortas. As células vivas permanecem incolores quando submetidas a esse tratamento, pois usa atividade metabólica reduz o corante tornando-o incolor.

4.1. Sem corante

1. Misturar fermento biológico em água estéril.

2. Com auxílio de uma alça de platina, transferir uma gotícula da cultura para o centro de uma lâmina.

3. Recobrir a cultura com uma lamínula e levar a microscópio para observação.

4.2. Com corante

1. Adicionar algumas gotas de azul de metileno à preparação de fermento biológico e aguardar 2 min.

2. Proceder como nos itens 2 e 3 do procedimento (4.1).

3. Observar se as células estão coradas ou não.

4.3. Com outras culturas

1. Retirar uma alíquota do recipiente onde ocorreu a infusão.

2. Transferir a alíquota com auxílio da alça de platina ou pipeta de Pasteur para o centro de uma lâmina.

3. Se desejar colocar uma gota de azul de metileno sobre a preparação e aguardar 2 min.

4. Proceder como nos itens 2 e 3 do procedimento (4.1).

4.4. Relatório

1. Desenhe o que foi visualizado na observação direta de microrganismos.

2. Relatar o que aconteceu quando se utilizou o azul de metileno.

3. Pesquisar outros corantes que possam ser empregados em microscopia.

OBSERVAÇÕES

Confecção dos relatórios

- Iniciar os relatórios com uma introdução sucinta, de forma a deixar claro os objetivos e as técnicas que serão empregadas na prática em questão. Não é necessário incluir o procedimento constante do roteiro.

- Descrever os resultados obtidos.

- Pesquisar o que foi pedido no roteiro, neste caso colocando a bibliografia utilizada.

- Fazer uma breve conclusão.