Termotolerantes

Coliformes termotolerantes

São definidos como microrganismos do grupo coliforme capazes de fermentar

a lactose a 44-45°C, sendo representados principalmente pela Escherichia coli

e, também por algumas bactérias dos gêneros Klebsiella, Enterobacter e

Citrobacter. Dentre esses microrganismos, somente a E. coli é de origem

exclusivamente fecal, estando sempre presente, em densidades elevadas nas

fezes de humanos, mamíferos e pássaros, sendo raramente encontrada na

água ou solo que não tenham recebido contaminação fecal. Os demais podem

ocorrer em águas com altos teores de matéria orgânica, como por exemplo,

efluentes industriais, ou em material vegetal e solo em processo de

decomposição. Podem ser encontrados igualmente em águas de regiões

tropicais ou sub-tropicais, sem qualquer poluição evidente por material de

origem fecal. Entretanto, sua presença em águas de regiões de clima quente

não pode ser ignorada, pois não pode ser excluída, nesse caso, a possibilidade

da presença de microrganismos patogênicos.

Os coliformes termotolerantes não são, dessa forma, indicadores de

contaminação fecal tão bons quanto a E. coli, mas seu uso é aceitável para

avaliação da qualidade da água. São disponíves métodos rápidos, simples e

padronizados para sua determinação, e, se necessário, as bactérias isoladas

podem ser submetidas a diferenciação para E. coli. Além disso, na legislação

brasileira, os coliformes fecais são utilizados como padrão para qualidade

microbiológica de águas superficiais destinada a abastecimento, recreação,

irrigação e piscicultura.

Material e métodos

As colheitas foram realizadas entre os meses de março e abril, abrangendo quarenta unidades de alimentação localizadas no entorno da Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE) e da Universidade Federal de Pernambuco (UFPE). Essas unidades são abastecidas pela rede de distribuição pública e o armazenamento interno é feito por meio de cisternas e/ou caixas-d'água.

Coleta do material

O procedimento de coleta seguiu o protocolo conforme o Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. Os recipientes para a coleta foram lavados, secos e, em seguida, adicionados de 0,1mL de tiossulfato de sódio (Na2S2O3) a 10% para cada 100mL de água a ser coletada. A adição desse composto ao frasco teve por finalidade impedir a ação do cloro residual. Posteriormente, os frascos foram esterilizados a 121ºC por 21 minutos. A assepsia das torneiras dos locais de coleta foi realizada com solução de álcool iodado (2%), por meio de pulverização por dentro e por fora e depois se abriu a torneira por alguns minutos. As amostras foram coletadas de um único ponto de saída de água empregado em cada estabelecimento para realização das preparações culinárias, essas acondicionadas em caixas isotérmicas e encaminhadas ao laboratório.

Pesquisa de coliformes totais

Todas as amostras foram submetidas a um ensaio presuntivo utilizando-se o teste presença-ausência (PA). Este teste qualitativo é uma modificação simples da técnica dos tubos múltiplos e se baseia na capacidade das bactérias do grupo coliforme em fermentar a lactose, produzindo, assim, ácidos e gases que irão ser evidenciados nesse procedimento. Cada 100mL de amostras foram vertidos cuidadosamente em recipientes contendo 50mL de caldo PA triplo, acondicionados em um recipiente estéril com seus respectivos tubos de Durhan invertidos e posteriormente incubados a 35ºC ± 0,5 por 24/48horas em estufa bacteriológica. Foram consideradas positivas as amostras que apresentaram reação presuntiva positiva, observada pela mudança de coloração do meio (de púrpura para amarelo) e pela produção de gás. As amostras positivas para o teste PA foram submetidas a teste confirmatório em caldo lactose verde brilhante bile 2%(CLVBB)13.

Pesquisa de coliformes termotolerantes

Em seguida, as amostras que evidenciaram formação de gás em CLVBB foram inoculadas em tubos de ensaio contendo 10 mL de caldo EC e incubadas em banho-maria a 44,5ºC ± 0,2 por 24/48 horas. Essa última etapa teve por objetivo a pesquisa de coliformes termotolerantes13.

Resultados e discussão

A Portaria nº 518 do Ministério da Saúde11 estabelece como padrão de potabilidade, para a água destinada ao consumo humano, a ausência de bactérias do grupo dos coliformes termotolerantes, anteriormente denominados coliformes fecais.

Na Tabela 1, observa-se que 62,5% das amostras analisadas apresentaram coliformes totais. Portanto, essas amostras são consideradas