Métodos de Purificação de Proteínas

Amália Alson Jovo

Métodos de purificação de proteínas

Licenciatura em Zootecnia

1o Ano

 

        

Universidade Save

Chongoene

2023

        

Amália Alson Jovo

Métodos de purificação de proteínas

Trabalho a ser apresentado na faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia ,curso de licenciatura em zootecnia, na cadeira de Bioquímina para o efeito avaliativo, sob orientação do PhD Simão Balane

 

        

Universidade Save

Chongoene

2023

        

Índice 

1.0.        Introdução        4

2.0.        Objectivos        4

2.1.        Geral        4

2.2.        Específicos        4

3.0.        Metodologia        4

4.0.        Métodos de purificação de proteínas        5

4.1.        ELETROFORESE        5

4.2.        Centrifugação diferencial        5

4.2.1.        Purificação Proteica: Fracionamento        5

4.2.2.        Purificação Proteica: Preparação        5

4.3.        Métodos Cromatográficos        5

4.4.        Métodos Cromatográficos        5

4.4.1.        Tipos de Cromatografia em Coluna        5

4.5.        Cromatografia de troca iónica        6

5.0.        Conclusão        7

6.0.        Referências bibliográficas        8

1.  Introdução

O presente trabalho fala sobre métodos de purificação de proteínas, no âmbito da cadeira de bioquímica, A purificação de proteína é o processo pelo qual obtém se uma proteína de interesse a partir de uma amostra biologia, como um tecido.

1. Objectivos

1. Geral

• Compreender os métodos de purificação de proteínas.

1. Específicos

• Identificar os métodos de purificação de proteínas
• Descrever os tipos de purificação de proteínas

1. Metodologia  

 Para a realização deste trabalho, recorreu-se a pesquisas exploratória que consistiu na consulta de diferentes obras electrónicas e físicas que abordam directa ou indirectamente, o tema em causa.

 

        

 

1. Métodos de purificação de proteínas

1.  ELETROFORESE

A eletroforese é uma técnica relativamente simples e rápida e de alto valor informativo, que consiste na migração de molécula ionizadas de acordo com suas cargas elétricas e massa molar, submetidas a um campo elétrico.

• O suporte mais utilizado para conduzir a eletroforese é o gel de poliacrilamida, em condições nativas e desnaturantes.
• Sistema SDS-PAGE serve para a determinação da massa molar das proteínas presentes em uma amostra.

1. Centrifugação diferencial

Centrifugação diferencial é usada para separar organelas, pedaços de membranas e citosol (fracção solúvel do citoplasma) do extrato celular.

1. Purificação Proteica: Fracionamento

• Separação das proteínas do extrato em diferentes frações com base no tamanho, carga;
• Salting out;
• Precipitação proteica com elevada concentração salina;  
• ((NH4)2SO4) sulfato de amônio;
• A adição de um sal na quantidade correta pode precipitar algumas proteínas e manter outras em solução.

1. Purificação Proteica: Preparação

 Solução proteica passa por modificações para uma purificação eficiente;  

 Diálise: separa proteínas de pequenos solutos se aproveitando do maior tamanho das proteínas.