Extração De DNA

UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS

INSTITUTO DE CIÊNCIAS EXATAS E TECNOLOGIA

CURSO BACHARELADO EM FARMACIA

EXTRAÇÃO CASEIRA DE DNA

KEROLEN DA SILVA COSTA

LEANDRO SIQUEIRA FERNANDES

MARCELA SILVEIRA DIAS CRUZ

ITACOATIARA – AM

2013

RESUMO

O DNA (ácido desoxirribonucleico) é um dos ácidos nucleicos que constituem o material genético da maioria dos seres vivos. O DNA é formado por nucleotídeos, e cada nucleotídeo é formado por uma molécula de desoxirribose, uma molécula de fosfato e uma base nitrogenada que pode ser púrica ou pirimídica. A metodologia se meu deu pela maceração e inserção de alguns reagentes comuns como: o álcool, sal e o detergente. Assim, foi possível a extração e visualização a olho nu da extração do DNA do morango.

1. INTRODUÇÃO

O DNA é um longo polímero formado por unidades repetidas chamadas nucleotídeos. A cadeia de DNA tem 2,2 a 2,4 nanômetros de largura, e um nucleotídeo possui aproximadamente 0,33 nanómetros de comprimento. Embora os monômeros (nucleotídeos) que constituem o DNA sejam muito pequenos, os polímeros de DNA podem ser moléculas enormes, com milhões de nucleotídeos. Em organismos vivos, o DNA não existe como uma molécula única (cadeia simples), mas sim como um par de moléculas firmemente associadas. As duas longas cadeias de DNA enrolam-se como uma trepadeira formando uma dupla hélice. Os nucleotídeos estão presentes em ambas as cadeias da dupla hélice, unidos com nucleótidos da mesma cadeia por ligações fosfodiéster e à cadeia complementar através de pontes de hidrogénio formadas pelas suas bases. Em geral, uma base ligada a um açúcar é chamada nucleotídeo e uma base ligada a um açúcar e um ou mais fosfatos é chamada nucleotídeo. Portanto, o DNA pode ser referido como um polinucleotídeo.

A cadeia principal do DNA é formada por fosfato e resíduos de açúcar, dispostos alternadamente. O açúcar no DNA é 2-desoxirribose, uma pentose . Os açúcares são unidos por grupos fosfato que formam ligações fosfodiester entre o terceiro e quinto átomos de carbono dos anéis de açúcar adjacentes. Estas ligações assimétricas significam que uma cadeia de DNA tem uma direção. Numa dupla hélice, a direção dos nucleotídeos de uma cadeia é oposta à direção dos nucleotídeos da outra cadeia. O formato das cadeia do DNA é designado antiparalelo. As terminações assimétricas das cadeias de DNA são designadas terminais 5' (cinco linha) e 3' (três linha). Uma das diferenças principais entre o DNA e o RNA encontra-se no açúcar, com a substituição da 2-desoxirribose no DNA pela ribose no RNA.

A dupla hélice do DNA é estabilizada por pontes de hidrogênio entre as bases presas às duas cadeias. As quatro bases encontradas no DNA são a adenina (A), citosina (C), guanina (G) e timina (T). Estas quatro bases ligam-se ao açúcar/fosfato para formar o nucleotídeo completo.

2. MATERIAIS E MÉTODOS

2.1. MATERIAIS

• Saco plático tipo “zip loc”

• 02 morangos frescos

• 01 peneira

• Álcool Etílico (92,8 INPM)

• 03 tubos de ensaios

• 01 lâmina

• 01 pincel

• 01 béquer de 500 mL

• 01 béquer de 250 mL

• Suporte de tubos de ensaio

• 01 béquer com 150 mL de solução de extrato de DNA

• 01 colher de chá

• 01 colher de sopa

• Detergente

• Sal

• 01 Funil

• Água

2.2. METODOS

Inicialmente tirou-se a folha verde dos morangos. Em seguida, colocou-se os morangos dentro de um saquinho plástico para maceração até obtida uma mistura homogênea. Para o preparo da solução para extração de DNA, em um béquer, misturou-se 150 mL de água, uma colher de sopa de detergente e uma colher de chá de sal de cozinha, mexeu-se bem, porém cuidadosamente para não espumar.

Consequentemente, foi colocado cerca de 50 mL da solução da extração do DNA sobre a massa do morango, vedado o saco plástico e misturado levemente por cerca de 15 minutos. Foi incubado a temperatura ambiente por 30 minutos. Foi mexido de vez em quando. Colocou-se uma peneira sobre o béquer limpo e passar a mistura para retirar os pedaços de morango. Foi dividido o liquido resultante em dois ou três tubos de ensaio com o auxilio do funil. Foi colocado apenas cerca de 3 dedos no fundo do tubo.

Por fim, foi despejado delicadamente sobre a solução nos tubos uma quantidade de álcool comum que o volume do morango. Não misturamos o álcool com a solução. Aguardamos cerca de 3 minutos para o DNA começar a precipitar. Com o auxilio