Apostila de microbiologia

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INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA DA BAHIA

APOSTILA DE AULAS PRÁTICAS - QUALIDADE DA ÁGUA

LABORATÓRIO DE BIOQUIMICA

Organizado por:

Daniel Von Rondon Martins

Gabriel Victor Gomes Ferrari

EUNÁPOLIS

2013

Conteúdo

ALCALINIDADE        

CLORETOS        

CLOROFILA a        

COLIFORMES TOTAIS E ESCHERICHIA COLI (método COLItest®)        

CONTAGEM DE BACTÉRIAS HETEROTRÓFICAS TOTAIS        

CONDUTIVDADE        

COR        

DEMANDA BIOQUIMICA DE OXIGÊNIO - DBO  & OXIGÊNIO DISSOLVIDO        

DEMANDA QUIMICA DE OXIGÊNIO        

DUREZA, CÁLCIO E MAGNÉSIO        

FERRO TOTAL        

FÓSFORO TOTAL        

MANGANÊS        

NITROGÊNIO (NTK)        

PH        

SÓLIDOS        

TURBIDEZ        

---

        

ALCALINIDADE

1-PRINCIPIO DO METODO

        A amostra é submetida à titulação, usando como titulante ácido do sulfúrico diluído (H2SO4 0,02 eq l-1). O resultado é expresso como equivalentes de CaCO3. Para amostras com pH inicial > 8,3, o ponto de viragem do indicador fenolftaleina (rosa → incolor), correspondendo ao ponto de conversão de carbonato em bicarbonato. Na segunda etapa a titulação prossegue até pH 4,5, o ponto de viragem do indicador bromocresol verde (azul → verde), correspondendo, aproximadamente, a ponto de equivalência de conversão de bicarbonato em ácido carbônico. Maior exatidão pode ser conseguida por titulação potenciométrica.

2-COLETA E PRESERVAÇÃO DA AMOSTRA

        Deve-se coletar 200 ml da amostra em frasco de polietileno e conserva-la sob refrigeração a 4°C. O prazo para análise é de 24 horas.

3-MATERIAL

Pipeta volumétrica de 100 ml

Erlenmeyer de 250 ml

Bureta de 25 ml ou 50 ml

Béquer de 50 ml

4-REAGENTES

Solução de ácido Sulfídrico (H2SO4) 0,1 eq l-1. – colocar cerca de 500 ml de água destilada em balão volumétrico de 1000 ml. Deixar cair de uma pipeta, gota á gota, 2,8ml de ácido sulfídrico (H2SO4) concentrado. Resfriar, completar o volume e homogeneizar.

Solução de ácido Sulfúrico (H2SO4) 0,02 eq l-1 – Transferir 200 ml da solução de H2SO4  0,1 eq l-1 para um balão volumétrico de 1000 ml e completar o volume de água destilada.

Padronização de H2SO4: Transferir 20 ml de Na2CO3 0,02 eq l-1 para um erlenmeyer de 250 ml, adicionar 3 gotas de alaranjado de metila. Titular com a solução de H2SO4 aproximadamente 0,02 eq l-1 até o ponto de viragem, caracterizado pelo aparecimento de uma coloração vermelha.

Fator de correção (FC) =                20 ml             .

                                       Volume de H2SO4 (ml)

Normalidade = FC x 0,02 eq l-1

        Solução de carbonato de sódio (Na2CO3). 0,02 eq l-1 – Secar de 3g a 5 g de carbonato de sódio (Na2CO3) a 25°C por quatro horas e resfriar em um dissecador. Pesar exatamente 1,060g e dissolver em balão de 1000 ml. Completar o volume com água destilada e homogeneizar.

        Solução indicadora de fenolftaleína (pH 8,3)

        Solução indicadora de bromocresol verde (pH 4,5)

5-METODOLOGIA

        Pipetar 100 ml da amostra, transferir para um erlenmeyer de 250 ml e adicionar 3-5 gotas de fenolftaleína.

        Caso amostra apresente coloração rósea, a mesma deve ser titulada com acido sulfúrico 0,02 eq l-1 até a descoloração. Anotar o volume gasto de ácido como “F”.

        Adicionar a seguir 3-5 gotas de bromocresol verde, e seguir com a titulação até o ponto de viragem da cor azul para a cor esverdeada. Anotar o volume gasto como “B”. Deve-se analisar uma prova em branco (usando água destilada e indicador), adicionando o ácido sulfúrico 0,02 eq l-1 até o ponto de viragem, para servir como controle.

        Anotar o volume total gasto de ácido sulfúrico 0,02 eq l-1 usado como “T” (gasto de acido 0,02 eq l-1 com fenolftaleína e com bromocresol verde). Logo:

        F = Volume em ml de solução 0,02 eq l-1 de H2SO4 necessário para titulação da amostra, até o ponto de viragem da fenolftaleína

        B = Volume em ml de solução 0,02 eq l-1 de H2SO4 necessário para a titulação da amostra, até o ponto de viragem do bromocresol verde.

        T = F+B = Volume total de solução gasto de solução 0,02 eq l-1 de H2SO4 consumido na titulação.