A Coleta de Sangue Venoso e Realizar a Separação do Soro

1. INTRODUÇÃO:

      O sangue venoso é o material biológico mais largamente utilizado em hematologia; por esse motivo devemos dar ênfase à coleta desse tipo de amostra. Os acessos usados, com maior frequência, para coleta de sangue são as veias cubital mediana, cefálica e basílica, todas localizadas no membros superiores; mas, de acordo com a situação do paciente, outras veias podem ser utilizadas. Escolhido o acesso, peça ao paciente que feche a mão e puncione; assim que o fluxo sanguíneo for iniciado usando a seringa ou coleta a vácuo solicite ao paciente que abra a mão. Preencha os tubos necessários e os homogeneíze, e solte o torniquete e faça o curativo do local com adesivo.

1. OBJETIVO:

• Coletar sangue venoso e realizar a separação do soro

1. MATERIAL E METODO

QUANTIDADE	DESCRIÇÃO DA VIDRARIAS E EQUIPAMENTOS
02	Tubo de plástico com gel separador e ativador de coágulo (tampa amarela)
01	Estante para tubos de Ensaio
01	Pipeta Semiautomática de 1000µL
02	Ponteiras descartáveis de 1000 µL
02	Eppendorf
02	Seringas e agulhas
01	Garrote
01	Álcool 70%
01	Algodão
02	Curativo adesivo Band aid
01	Centrifuga para separação de soro
01	Caixa para descarte de material perfure cortante
02	Luvas

 

4.3.        Procedimento Técnico

4.3.1 Coleta de sangue

1. Higienize as mãos, coloque as luvas;
2. Identificar os tubos;
3. Coloque a agulha na seringa sem retirar a capa protetora, Não toque na parte inferior da agulha;
4.  Movimente o êmbolo e pressione-o para retirar o ar;
5. Ajuste o garrote e escolha a veia;
6. Faça a antissepsia do local utilizando algodão umedecido em álcool a 70%, com um movimento circular do centro para fora. Permitir a secagem da área por 30 segundos para prevenir hemólise da amostra e reduzir a sensação de ardência na punção. Não assoprar, não abanar e não colocar nada no local e não tocar mais no local desinfetado;
7. Retire a capa da agulha e faça a punção, introduzindo a agulha com o bisel virado para cima;
8. Solte o garrote assim que o sangue começar a fluir na seringa, não puxar o êmbolo da seringa com muita força;
9. Colete aproximadamente 5,0 ml de sangue;
10. Separe a agulha da seringa, descarte a agulha na caixa de perfure cortante, não ultrapassando 2/3 do limite da capacidade;
11. Oriente o paciente a pressionar com algodão a parte puncionada, mantendo o braço estendido, sem dobrá-lo;
12. Transfira o sangue para um tubo de ensaio sem anticoagulante, escorra delicadamente o sangue pela parede do tubo. Este procedimento evita a hemólise da amostra. Descarte a seringa no lixo para materiais contaminados.
13. Esperar a coagulação do material para centrifugar, neste caso 30 minutos.

OBS: Jamais reencape agulhas

4.3.2 Obtenção do soro

1. Posicionar os tubos na centrifuga. Balancear para minimizar o risco de quebra. Os tubos devem ser agrupados de acordo com o tipo, por exemplo: tubos com o mesmo volume de aspiração, tubos de tamanhos iguais, tubos de vidro com tubos de vidro, tubos com o mesmo tipo de tampa ou rolha de proteção, tubos com gel com outros do mesmo tipo, e tubos de plástico com tubos de plástico
2. Certificar-se de que os tubos estejam corretamente encaixados na caçamba da centrífuga. Um encaixe incompleto pode fazer com que a tampa de proteção do tubo se desprenda, ou que a parte superior do tubo fique fora da caçamba. Tubos de vidro ou plástico acima da caçamba podem chocar-se com a cabeça da centrífuga e quebrar-se.
3. Centrifugar a uma velocidade de 2.000 a 3.000 RCF de 4 a 5 minutos.
4. Aguardar até que a centrífuga pare completamente antes de tentar retirar os tubos. Nunca parar a centrífuga com a mão, usar o freio. A brusca interrupção, além de hemólise, pode deslocar o gel separador.
5. Retirar os tubos da centrifuga, observar se houve a total separação do soro sem a presença de fibrina e posicione-os na estande.
6. Utilizando a pipeta de 1000, pipetar o soro e reserva-lo nos Eppendorf, já identificados. Congelar a 4 a 8ºC por uma semana para preservação de alguns analitos bioquímicos. 

OBS: O soro dos tubos sem gel devem ser removidos da camada celular em até 2 horas após a coleta da amostra, conforme documento do CLSI H18-A3 - Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens; Approved Guideline, 3rded. Vol.24 No 38

RCF = força centrífuga relativa.

1.  RESULTADOS E DISCUSSÕES:

Depois de centrifugado no tempo estimado foi obtido um sobrenadante amarelado correspondendo ao soro sanguíneo, o que acontece é que a centrifugação desse sangue sem anticoagulante levou a coagulação do centrifugado, devido nesse processo, ter havido o consumo de fibrinogênio, assim como todos os fatores envolvido na coagulação, com a liberação de substâncias que se encontravam dentro da plaquetas; dessa forma constitui o soro.

...