RELATÓRIO TÉCNICO-CIENTÍFICO DETERMINAÇÃO COLORIMÉTRICA REAÇÃO DE BIURETO

UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS
CURSO DE ENGENHARIA FLORESTAL[pic 1][pic 2]

BIOQUIMICA

RELÁTORIO TÉCNICO-CIENTÍFICO

DETERMINAÇÃO COLORIMÉTRICA REAÇÃO DE BIURETO

Alunos:        Brenda Bárbara

Jade A. Ticks

Hallefy Junio de Souza

Rodrigo Lima

                Raquel Macedo Marquete

Goiânia, GO

Abril, 2015

UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS
CURSO DE ENGENHARIA FLORESTAL[pic 3][pic 4]

BIOQUIMICA

RELÁTORIO TÉCNICO-CIENTÍFICO

 DETERMINAÇÃO COLORIMÉTRICA REAÇÃO DE BIURETO

[pic 5]

Goiânia, GO

Abril, 2015

Introdução

O biureto é uma substância formada pela mistura de cobre, hidróxido de sódio e um complexo que estabiliza essa mistura. É um reagente de coloração azul que se torna violeta na presença de proteínas, a intensidade da coloração violeta varia vai depender da concentração de proteínas na amostra analisada.

O método de biureto tem sido aplicado para determinar a concentração de proteínas totais em diversos meios. Quando colocada uma amostra em um espectrofotômetro pode-se estimar a concentração da solução que contenha proteínas, emitindo luz monocromática de comprimento de onda de 530 nm.

O cobre, em meio alcalino, reage com proteínas. As ligações existentes na molécula de biureto são muito parecidas com as ligações peptídicas estabelecidas entre os aminoácidos durante a formação de peptídeos e das proteínas. É uma interação entre as ligações peptídicas de uma proteína ou peptídeo com íons Cu2+, como exemplificado a seguir:

[pic 6]

O intuito da aula é fazer os alunos quantificar calorimetricamente a proteína presente em uma amostra de concentração desconhecida, usando conhecimentos de espectrometria.

Parte experimental

• Materiais e reagentes

Materiais:

1. 5 tubos de Ensaios pequenos;
2. Caseína 1%;
3. Glicina 1%;
4. NaOH 1,0 mol\L;
5. Reativo de Biureto(sulfato de cobre 0,5%)
6. Espectrofotômetro
7. Agitador de tubos (vortex)  

Objetivos:

        Quantificar colorimetricamente a proteína presente em uma amostra de concentração desconhecida, usando os conhecimentos adquiridos nas aulas de espectrofotometria.

• Procedimento

Resultados e discussão

Conclusão

    As reações de coloração de proteínas permitem a caracterização das mesmas pela análise de suas diversas propriedades físicas e químicas (presença de ligações peptídicas, solubilidade, força iônica e concentração molar). A detecção de proteínas em materiais biológicos envolve reações especificas com determinados reativos, os quais originam substâncias com determinada coloração que absorvem luz na região visível, permitindo a sua quantificação. Apesar de alguns erros (provavelmente manipulação errada dos aparelhos), os resultados em sua totalidade atingiram as características pré-estabelecidas pelos conceitos teóricos da literatura.

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