RESUMO – Laboratório de cultura celular

RESUMO – Laboratório de cultura celular

        Para serem mantidas em laboratórios, as culturas de células precisam estar em condições especiais já discutidas, tais como temperatura favorável, meio de cultura, entre outros. Além disto, é necessário assegurar-se que o ambiente mantenha-se estéril,  já que a presença microrganismos podem inviabilizar os experimentos, desta forma algumas medidas devem ser tomadas, tais como um controle do acesso ao laboratório de cultura celular, indispensável o uso de EPIs (mascara, luvas, touca e jalecos) bem como de roupa/calçados fechados.

        Tem-se como um dos equipamentos deste laboratório o fluxo laminar, o qual fornecerá um ambiente estéril para a manipulação das células. Ele é dotado de filtros que tem como objetivo filtrar o ar que entra no equipamento. Dentro do fluxo deve-se encontrar apenas os materiais que serão utilizados no momento do experimento.

        As células são mantidas dentro das estufas de CO2, equipamento capaz de controlar tanto a temperatura quanto as concentrações de CO2. As garrafas de armazenamento das células não devem ser empilhadas, mas sim distribuídas pela estufa. Outro equipamento muito utilizado são os microscópios para a visualização das células.

        Além destes, tem-se como necessário as autoclaves, para esterilização da vidraria, estufas, para secagem das mesmas, banho maria, para aquecimento das soluções que serão aplicadas nas células, freezer -80ºC, para o armazenamento das células, entre outros. Importante frisar que todo material utilizado deve ser de uso exclusivo do laboratório de células.

        Antes do início de qualquer procedimento, a parte interna do fluxo deve ser higienizada com álcool 70 e a lâmpada de ultravioleta deve ser mantida ligada por de 20 a 30 minutos, o que tornará o ambiente estéril e livre de qualquer contaminação, além disto, todo o material que adentrar o fluxo após a esterilização também deve ser higienizado com álcool 70. Um descarte contendo um pouco de hipoclorito de sódio para descarte das ponteiras e microtubos utilizados durante o experimento, devendo ao fim do mesmo acondicionar os materiais em saco branco próprio para o descarte e o conteúdo liquido dispensado na pia. Novamente, deve se limpar com álcool 70 e ligar a lâmpada ultravioleta pelo mesmo período de tempo ao final do experimento.

        Em se tratando dos métodos de esterilização, tem-se os métodos físicos por calor, úmido como no caso da autoclave e seco das estufas, e por radiação ionizante. No método químico tem-se o uso de soluções, tendo como exemplo o glutaraldeído, o ácido peracético e o peróxido de hidrogênio, ou de gases, tais como o óxido de etileno, plasma de peróxido de hidrogênio e autoclave de formaldeído. Sendo o equipamento de esterilização mais utilizado nos laboratórios de cultura a autoclave.

        Deve-se manter um controle dos processos e do ambiente em que se trabalha dentro da cultura, sendo assim qualquer resíduo desta devem ser descartadas de modo correto e efetuando a devida descontaminação de tais. A temperatura e a umidade do laboratório devem ser controladas para evitar o crescimento de microrganismos no ambiente, ar condicionado é permitido desde que esteja adequado para as dimensões do laboratório.

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