Histologia

MATERIAL PARA ACOMPANHAMENTO DA DISCIPLINA DE HISTOLOGIA

PROF. RICARDO PENTEADO

Introdução à Histologia

Tecidos – Células + espaço inter celular.

Estudos limitados pelo microscópio / 1665 Robert Hook.

Microscópio ótico – Resolução 0.2 microns (01 micron = 0.001 milímetro) / Aumento – 1500X  

                              - Resolução = Distância mínima para que 02 partículas apareçam separadas.

Microscópio eletrônico – 1.500.000X.

Lâminas histológicas

M. O. – Transparência dos cortes. / Micrótono – Aparelho de corte.

Preparação -  Aproxima os tecidos fixados dos tecidos vivos.  

Etapas de preparação:  

- Fixação – Evita - Autólise por enzimas

                            - Degradação por bactérias.

                -  Insolubiliza proteínas dos tecidos.

                -  Formaldeído à 4.0%    Ph +/- 7.5 – tamponado.  

- Desidratação – Álcool etílico / [   ] crescentes de 70% à 100%.

- Clareamento ou diafanização – Líquido miscível com o meio de inclusão (parafina normalmente)

                                                   - Benzol / Xilol / Tuluol.

                                                   - Torna tecido translúcido.

- Impregnação – Resina ou parafina à 600C

                         - Benzol ou Xilol evaporam.

                         - Espaços preenchidos pela parafina

- Inclusão – Colocação em molde retangular com parafina.

- Corte – Micrótono – Parafina – 06 à 08 mícrons

                                 - Resina – 01 à 02 mícrons

             - Em microscopia eletrônica – 0.02 à 0.1 mícrons.

             - Congelamento – Preparo mais rápido – Sem parafina.

                                         - Criostato – Preserva – Lipídeos.

                                                                              - Enzimas.

- Coloração – Facilita a observação.

                     - Corantes básicos – Coram áreas ácidas (basofilia) ex: Hematoxilina / azul de metileno

                     - Corantes ácidos – Coram áreas básicas (acidofilia) ex: Eosina (citoplasma rosa)

                     - Tecidos nervosos – Metais (prata / ouro).

Microscópio Ótico

Parte ótica – Condensador / Objetivas / Oculares  - Aumento total = Objetiva X Ocular

Parte mecânica – Platina / Chariot / Macrométrico / Micrométrico.

Microscópio de contraste de fase – Para células vivas.

                                                       - Luz atravessa os tecidos em diferentes velocidades.

                                                       - Depende do índice de refração da luz

Microscopia eletrônica

Microscópio eletrônico de transmissão

       - Feixe de elétrons – Dificuldade em atravessar áreas eletrodensas / observa-se superfícies e  

                                                                                                                                           contornos

       - Nescessita de cortes muito finos (20 à 100 nanômetros) / 01 nanômetro = 0.000001 milímetros

       - Impregnação por resinas duras.

       - Corte com ultramicrômetro – Lâminas de vidro ou diamante.

       - Coloração especial – Metais pesados  - Ósmio / Chumbo / Urânio.  

Microscópio eletrônico de varredura – Projeta imagens em uma tela de TV.

Interpretação de Cortes Histológicos

- Estrutura alterada pelas técnicas de preparo.

- Retração das estruturas / Aparecimento de espaços claros.

- Perde a estrutura tridimensional.

- Cortes transversais – transversal ao sentido da estrutura / cortes longitudinais – sentido da estrutura

Rádio autografia – Detecta radioatividade / Sobre um filme fotográfico.

Centrifugação fracionada – de acordo com o coeficiente de sedimentação - tamanho/forma/densidade.

                     - Diferentes velocidades de centrifugação à diferentes tempos separam componentes

                                                                                                                                         celulares

                     - Homogeneização – Rompimento das paredes celulares

                     - Ex: 1.000G / 20 min. – núcleos celulares no fundo

                              10.000G / 20 min. – mitocôndrias e lisossomos no fundo.

Histoquímica e Citoquímica

     - localização de substâncias específicas nos cortes (Lipídeos / DNA / RNA / Polissacarídeos / etc).

EMBRIOLOGIA

Após a fecundação, O zigoto inicia vários processos de divisão celular (Mitose), originando o embrião. Com o desenvolvimento do embrião, inicia-se a formação de estruturas e tecidos que irão formar os órgãos e sistemas nos indivíduos. O tipo de desenvolvimento embrionário varia de grupo para grupo de animais, e isto depende muito do tipo de ovo, o que determina o tipo de segmentação ou clivagem que este sofre. Os ovos dos animais estão divididos de acordo com a quantidade e distribuição de vitelo.