Apostila de microbiologia
Por: Kamila Alves • 2/5/2015 • Trabalho acadêmico • 19.616 Palavras (79 Páginas) • 270 Visualizações
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INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA DA BAHIA
APOSTILA DE AULAS PRÁTICAS - QUALIDADE DA ÁGUA
LABORATÓRIO DE BIOQUIMICA
Organizado por:
Daniel Von Rondon Martins
Gabriel Victor Gomes Ferrari
EUNÁPOLIS
2013
Conteúdo
ALCALINIDADE
CLORETOS
CLOROFILA a
COLIFORMES TOTAIS E ESCHERICHIA COLI (método COLItest®)
CONTAGEM DE BACTÉRIAS HETEROTRÓFICAS TOTAIS
CONDUTIVDADE
COR
DEMANDA BIOQUIMICA DE OXIGÊNIO - DBO & OXIGÊNIO DISSOLVIDO
DEMANDA QUIMICA DE OXIGÊNIO
DUREZA, CÁLCIO E MAGNÉSIO
FERRO TOTAL
FÓSFORO TOTAL
MANGANÊS
NITROGÊNIO (NTK)
PH
SÓLIDOS
TURBIDEZ
ALCALINIDADE
1-PRINCIPIO DO METODO
A amostra é submetida à titulação, usando como titulante ácido do sulfúrico diluído (H2SO4 0,02 eq l-1). O resultado é expresso como equivalentes de CaCO3. Para amostras com pH inicial > 8,3, o ponto de viragem do indicador fenolftaleina (rosa → incolor), correspondendo ao ponto de conversão de carbonato em bicarbonato. Na segunda etapa a titulação prossegue até pH 4,5, o ponto de viragem do indicador bromocresol verde (azul → verde), correspondendo, aproximadamente, a ponto de equivalência de conversão de bicarbonato em ácido carbônico. Maior exatidão pode ser conseguida por titulação potenciométrica.
2-COLETA E PRESERVAÇÃO DA AMOSTRA
Deve-se coletar 200 ml da amostra em frasco de polietileno e conserva-la sob refrigeração a 4°C. O prazo para análise é de 24 horas.
3-MATERIAL
Pipeta volumétrica de 100 ml
Erlenmeyer de 250 ml
Bureta de 25 ml ou 50 ml
Béquer de 50 ml
4-REAGENTES
Solução de ácido Sulfídrico (H2SO4) 0,1 eq l-1. – colocar cerca de 500 ml de água destilada em balão volumétrico de 1000 ml. Deixar cair de uma pipeta, gota á gota, 2,8ml de ácido sulfídrico (H2SO4) concentrado. Resfriar, completar o volume e homogeneizar.
Solução de ácido Sulfúrico (H2SO4) 0,02 eq l-1 – Transferir 200 ml da solução de H2SO4 0,1 eq l-1 para um balão volumétrico de 1000 ml e completar o volume de água destilada.
Padronização de H2SO4: Transferir 20 ml de Na2CO3 0,02 eq l-1 para um erlenmeyer de 250 ml, adicionar 3 gotas de alaranjado de metila. Titular com a solução de H2SO4 aproximadamente 0,02 eq l-1 até o ponto de viragem, caracterizado pelo aparecimento de uma coloração vermelha.
Fator de correção (FC) = 20 ml .
Volume de H2SO4 (ml)
Normalidade = FC x 0,02 eq l-1
Solução de carbonato de sódio (Na2CO3). 0,02 eq l-1 – Secar de 3g a 5 g de carbonato de sódio (Na2CO3) a 25°C por quatro horas e resfriar em um dissecador. Pesar exatamente 1,060g e dissolver em balão de 1000 ml. Completar o volume com água destilada e homogeneizar.
Solução indicadora de fenolftaleína (pH 8,3)
Solução indicadora de bromocresol verde (pH 4,5)
5-METODOLOGIA
Pipetar 100 ml da amostra, transferir para um erlenmeyer de 250 ml e adicionar 3-5 gotas de fenolftaleína.
Caso amostra apresente coloração rósea, a mesma deve ser titulada com acido sulfúrico 0,02 eq l-1 até a descoloração. Anotar o volume gasto de ácido como “F”.
Adicionar a seguir 3-5 gotas de bromocresol verde, e seguir com a titulação até o ponto de viragem da cor azul para a cor esverdeada. Anotar o volume gasto como “B”. Deve-se analisar uma prova em branco (usando água destilada e indicador), adicionando o ácido sulfúrico 0,02 eq l-1 até o ponto de viragem, para servir como controle.
Anotar o volume total gasto de ácido sulfúrico 0,02 eq l-1 usado como “T” (gasto de acido 0,02 eq l-1 com fenolftaleína e com bromocresol verde). Logo:
F = Volume em ml de solução 0,02 eq l-1 de H2SO4 necessário para titulação da amostra, até o ponto de viragem da fenolftaleína
B = Volume em ml de solução 0,02 eq l-1 de H2SO4 necessário para a titulação da amostra, até o ponto de viragem do bromocresol verde.
T = F+B = Volume total de solução gasto de solução 0,02 eq l-1 de H2SO4 consumido na titulação.
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