O Relatório Enzimas

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Instituto Latino-Americano de Ciências da Vida e da Natureza – ILACVN

Ciências Biológicas.

RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS

ATIVIDADE DA ENZIMA CATALASE

Rocio Antonella López Sachelaridi

Bruno André Díaz Fogel

Valeria Belén Espínola Maciel

Prof.: Pablo Henrique Nunes

Foz de Iguaçu, PR

02 de Outubro de 2018

ATIVIDADE DA CATALASE

1. Introdução

As enzimas são proteínas, exceto por um pequeno grupo de moléculas de RNA, mas cabe ressaltar que nem todas as proteínas são enzimas. Estas estruturas possuem atividade catalítica atuando praticamente em todas as reações que caracterizam o metabolismo celular e tendo a capacidade de modificar a velocidade de ditas reações sem alterar o equilíbrio final. A atividade catalítica enzimática depende da integridade das suas conformações nativas, isto é que elas possuem especificidade por seus substratos, podendo controlar reações reversíveis tanto como irreversíveis.

A classificação das enzimas é dada segundo a reação que elas catalisam, os 6 grupos principais são: oxirredutases, liases, transferases, hidrolases, isomerases e ligases. No ponto de vista do mecanismo de ação elas podem ser do modelo chave-fechadura onde a enzima se encaixa perfeitamente com o substrato específico no sitio ativo sem sofrer modificações, ao contrário do modelo de encaixe por indução onde tanto a enzima quanto o substrato sofrem mudanças na conformação para o encaixe, no estado de menor energia.

A ação enzimática está sujeita a inúmeros fatores, sendo os mais importantes a temperatura, o pH e a concentração do substrato. No caso dos dois primeiros fatores citados, eles devem encontrar-se numa condição ótima para evitar as mudanças na conformação estrutural da enzima que causa a inativação das suas funções, processo chamado de desnaturação. Elevadas temperaturas provocam agitação intensa das moléculas que acabam quebrando as ligações de hidrogênio provocando dito fenômeno, já, enquanto ao pH, as cadeias laterais dos aminoácidos do sitio ativo da enzima podem funcionar como ácidos ou bases fracas em funções críticas e dependem da manutenção de certo estado de ionização, se estas forem alteradas podem provocar repulsão de cargas e ocorre a desnaturação. O outro fator depende da concentração do substrato, ao chegar ao ponto de saturação da enzima, diz-se que a velocidade de reação é a máxima, se aumentarmos a concentração, a velocidade ficará constante pelo fato de ter mais substrato em relação à enzima.

A catalase foi uma das primeiras enzimas estudadas, ela possui conformação tetramérica e sua função é decompor o peróxido de hidrogênio em água e oxigênio molecular, evitando que as células sofram danos oxidativos, pois é importante na remoção deste composto tóxico no organismo produzido pelas oxidases envolvidas na β-oxidação de ácidos graxos, fotorrespiração e catabolismo de purinas. Esta enzima é produzida no reticulo endoplasmático rugoso e encontrada em organelas subcelulares denominada peroxissomos, principalmente no sangue, fígado e nos rins. Já nas células vegetais estão presentes nos peroxissomos, glixiossomos e organelas relacionadas, mas também podem estar presentes em mitocôndrias e no citoplasma.

 

1. Objetivos: 

Observar a atividade e a possível inativação da enzima catalase devido a ação da temperatura e do pH.

1. Materiais

• Batata (crua e cozida)
• Fígado (cru e cozido)
• Peróxido de Hidrogênio (água oxigenada)
• Conta gotas
• Papel toalha
• Almofariz com pistilo
• Placas de Petri
• 5 tubos de ensaio (com estante)
• Marcador permanente (para marcar os tubos)
• Espátula
• Pinças
• Lâminas de barbear
• Areia fina
• Suco de limão
• Faca ou bisturi

1. Métodos

1. Preparação dos cortes

Procedimento 1

Cortou-se duas rodelas de cada batata, numa placa Petri o material cru e em outra o material cozido.

Procedimento 2

Utilizou-se 5 tubos de ensaio diferentes enumerados de 1 a 5. Foram cortados alguns pedaços de fígado cru e posteriormente colocados nos tubos 1 e 2. Logo, foram cortados alguns pedaços do fígado cozido e colocado no tubo 3. Para a outra amostra cortou-se um pedaço de fígado cru e foi misturado com areia realizada com auxílio do almofariz e do pistilo para a trituração do material que posteriormente foi colocado no tubo de ensaio número 4. No tubo 5 foi inserida uma porção de areia.

1. Aplicação das sustâncias nos tubos

Procedimento 1

Foi adicionada algumas gotas de água destilada sobre uma rodela de batata crua e também sobre uma rodela de batata cozida, observou-se os resultados. Logo, realizou-se a aplicação de algumas gotas do peróxido de hidrogênio sobre as rodelas restantes.

Procedimento 2

Por outro lado, no tubo 2 foi acrescentado aproximadamente 2 mL de suco de limão, deixando-o repousar alguns minutos. Depois, foi adicionado em cada tubo cerca de 2 mL de água oxigenada e observou-se os resultados.

1. Descrição dos resultados

- Procedimento 1

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Batata crua

Do lado direito, a amostra na qual foi aplicada algumas gotas de água destilada. Observou-se que a mesma não apresentou nenhum indício de reação. Do lado esquerdo, a amostra que apresentou aparência espumosa na superfície quando entrou em contato com o peróxido de hidrogênio, isto indica que ocorreu uma reação.  

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Batata cozida

Em nenhum dos casos foi observado indícios de reação, tanto na amostra que continha água destilada nem na amostra que foi aplicada água oxigenada.