Relatório Atividade Amilasica

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ

CENTRO DE CIÊNCIAS

DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA

PESQUISA DA ATIVIDADE AMILÁSICA NO TRATO DIGESTÓRIO DE VERTEBRADOS E INVERTEBRADOS

Relatório apresentado à disciplina Fisiologia Animal Comparada

Antonio Lucas Araujo de Abreu

Maria Virginia Oliveira da Silva  

Introdução

As enzimas, também conhecidas como catalisadores orgânicos, são  grupos de substâncias orgânicas de natureza normalmente proteica que atuam acelerando reações. Alguns animais ao ingerir alimentos que possuem amido, em sua composição, a enzima amilolítica (ptialina ou a-amilase) entra em ação desdobrando o amido em moléculas menores de maltose facilitando o processo. O presente trabalho possui como objetivo pesquisar a atividade amilásica em partes variadas do trato digestório de animais vertebrados e invertebrados e tendo-se em vista que ambos possuem hábitos alimentares diferentes, associar com a atividade amilásica em questão.

Materiais e Métodos

Em sala, a professora recolheu os invertebrados que os alunos trouxeram para o experimento e foram colocados no freezer durante 15 minutos. Em quanto esperávamos, a turma foi separada em grupos de 5 a 6 pessoas na bancada e foi feito uma listagem por filo quanto a cada animal que foi levado para a aula. Após os 15 minutos, os especimes foram devolvidos ao grupo que o trouxe e utilizando-se do gral e do pistilo, foi acrecentado um pouco da solução salina fisiológica com o animal e em seguida foi macerado. O resultado da maceração foi filtrado utilizando-se um pedaço de tecido nylon, no qual sairia só o liquido sem pedaços desnecessários para o tubo de eppendorf.

Após todos macerarem e filtrarem, os tubos de eppendorf contendo a solução foram colocados em banho de gelo por 10 minutos. Durante a espera pegamos as placas de petri que já estavam preparadas com ágar-ágar e amido e fizemos 9 orificios, um no meio como controle e 8 ao redor, tendo o cuidado para não falar próximo pois a saliva humana contém amido e poderia infectar o material obtendo um resultado tedencioso. Ao fim do tempo de espera, cada grupo selecionou 9 amostras que estavam no banho de gelo e utilizando-se da pipeta autómatica, foi aplicado 0,02ml de cada em cada oríficio do gel, sempre trocando as pipetas e cobrindo a placa de petri com outra após a solução ser colocada para que não houvesse contaminação. Terminado essa etapa, as duas placas de petri foram entregues aos monitores para que fossem encubadas a 37ºC durante 2 horas, ao fim desse tempo alguns alunos voltaram para ver o resultado, o lugol foi acrescentado pelos monitores e a reação anotada.

Resultados

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Observar-se que certos poços estão com coloração diferentes sendo da cor marrom ou preto. A presença e ausência da amilase é determinada pela coloração marrom ou preta, respectivamente. A origem dos halos na placa de Petri é devido ausência de amido, logo sua  formação indica presença de atividade amilásica sendo assim, cada halo formado define que aquele poço foi degradado pela amilase.

O controle do positivo do experimento foi a saliva, pois nela encontra-se  amilase  que tem como função a degradação de amido, logo contribui na digestão dos alimentos, no qual o processo começa pela boca. Já o controle negativo, foi a salina (NaCl 0,9%) que tem ausência da enzima, portanto foi usada mais para controle do experimento.

Tabela: Resultados da Atividade Amilásica de cada poço

Ordem dos poços na placa de petri com Agar- Agar	Animais usados ou partes de organismo	Reação da Amilase (Presença / Ausência)
1	Salina	Ausência
2	Saliva	Presença
3	Anelídeo	Presença
4	Miriápode	Presença
5	Aracnídeo	Ausência
6	Lepidóptera	Ausência
7	Coleóptero	Ausência
8	Pâncreas	Presença
9	Estomago	Presença

Discussão

Foi observado que na placa de Petri  da esquerda, os poços 2 e 8 formaram halos que indica atividade amilásica determinando que essas partes do organismo são encontradas amilases. já no resto dos poços ocorreu ausência da atividade da enzima.