O Antiobiograma na Bioquímica

ANTIBIOGRAMA

Alexandre Müller de Santi RA: 344463989482

Aline Aparecida Espadotto RA: 349705289482

Jaqueline Sagio Agostinho RA: 346646389482

Juliana Mayara dos Santos Nascimento RA: 347798189482

Larrise Correia Alves RA: 346149989482

Mayra Cristie Souza Barreto RA: 185546289482

Raphaela Ramos Silveira RA: 349447789482

Faculdade Anhanguera de Campinas – Unidade Taquaral

Curso de Odontologia

Turma 2º A – Noturno

Disciplina: Odontologia Morfofuncional do Ecossistema Bucal

Data da realização do experimento: 30/10/2019.

Profa. MSc. Ângela Cristina Ito

ALEXANDRE MÜLLER DE SANTI ALINE APARECIDA ESPADOTTO JAQUELINE SAGIO AGOSTINHO JULIANA MAYARA DOS SANTOS NASCIMENTO LARISSE CORREIA ALVES MAYRA CRISTIE SOUZA BARRETO RAPHAELA RAMOS SILVEIRA

ANTIBIOGRAMA

Trabalho avaliativo do curso de Odontologia apresentado a Faculdade Anhanguera - Unidade Taquaral, requisito parcial à obtenção de nota complementar bimestral nas Atividades em Sala de Aula.

Orientadora: Profa. MSc. Ângela Cristina Ito

Campinas - SP

2019

SUMÁRIO

1. INTRODUÇÃO        4

2. OBJETIVOS        5

3. MATERIAL UTILIZADO        5

4. METODOLOGIA        6

5. RESULTADOS E DISCUSSÃO        8

6. CONCLUSÃO        10

7. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS        11

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1. INTRODUÇÃO

O Antibiograma ou Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos (TSA) é uma prova utilizada para alguns grupos de bactérias principalmente as que adquirem resistência facilmente, entre elas as Enterobactérias. O antibiograma é um ensaio que mede a susceptibilidade ou resistência de uma bactéria aos antibióticos através do espectro de sensibilidade identificados na placa de cultura. Ágar Mueller-Hinton é um meio de cultura em placas recomendado para a realização de antibiograma, é rico em proteínas e carboidratos que fornece o substrato ideal para o desenvolvimento e crescimento de cepas bacterianas de interesse clínico. Podendo ser utilizado para o teste de sensibilidade OU resistência aos antibióticos de bactérias Gran-positivas ou Gran-negativas, aeróbicas ou anaeróbicas facultativas, comumente encontradas em alimentos e espécimes clínicos. O teste é feito utilizando discos de difusão antibióticos depositados sobre a superfície do meio onde se inoculou, por espalhamento, uma amostra de cultura bacteriana previamente crescida em meio líquido.

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2. OBJETIVOS

Aprender a realizar o método do disco-difusão em Ágar Mueller-Hinton e conhecer alguns dos antimicrobianos que são usados no laboratório de microbiologia. Verificar a sensibilidade, resistência e a eficiência da bactéria aos antibióticos: Amoxicilina (AMC) de 30 microgramas, Clindamicina (CLI) de 2 microgramas e Cloranfenicol (CLO) de 30 microgramas, frente ao crescimento da Escherichia Coli (E. coli) em meio de cultura adequado.

1. MATERIAL UTILIZADO

• Cultura bacteriana em Caldo Nutriente a ser testada: Gram-negativa - Escherichia coli (fornecida pela instituição);

• Placa de Petri com meio de cultura: Ágar Mueller-Hinton;

• Placa de Petri;

• Discos variados de difusão de antibióticos (cada um destes apresenta uma concentração padrão, fixa);

• Bico de Busen;

• Alça de platina;

• Swab (estéril);

• Pinça anatômica (estéril);

• Tubo de ensaio com tampa (com solução salina estéril 0,5%);

• Escala McFarland;

• Caneta marcadora de texto;

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• Estante para tubo de ensaio.

[pic 1]

Figura 1. Parte do material utilizado para o Antibiograma. Arquivo pessoal.

[pic 2]

Figura 2. Turbidez Padrão (Escala McFarland de 0,5 a 10). Arquivo pessoal.

Discos de antibióticos

• Amoxicilina (AMC) 30 microgramas;

• Clindamicina (CLI) 2 microgramas;

• Cloranfenicol (CLO) 30 microgramas;

• Branco (sem medicação).

Equipamentos

• Estufa de crescimento de cultura bacteriológica;

• Geladeira.

1. METODOLOGIA

Todo o procedimento foi realizado em torno do bico de Bunsen aceso.

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1. Preparo do Inóculo Bacteriano

Foi utilizada a alça de platina devidamente esterilizada na chama do bico de Busen até atingir a cor rubra, logo após é feita a coleta de duas alçadas na superfície do Ágar, no meio de cultura com as colônias da bactéria Escherichia coli (E. coli).

2. Inoculação da placa

Após a coleta das colônias, deve se abrir o tubo de ensaio com solução salina e inserira alça de inoculação para diluir a colônia coletada, o tubo então deve ser fechado, logo após deve ser feita a esterilização da alça, pois a mesma se encontra contaminada, após a esterilização devolvemos a mesma a bancada. Então é feita a agitação do tubo segurando-o pela tampa, após a agitação podemos saber se a solução atingiu a turvação semelhante à do tubo com concentração padrão pré-estabelecida, que é correspondente a 0,5 da escala de McFarland. O tubo é aberto novamente e deve se inserir o swab estéril mergulhando-o na solução, então deve se abrir a placa com o meio de cultura Ágar Mueller-Hinton, e com o swab devidamente molhado, espalhamos por toda a superfície do Ágar, assim semeando a solução que tem culto em bactérias, cobrindo toda a placa. Terminado o swab deve ser guardado em sua embalagem original e deve ser deixado próximo à chama para o descarte no final do procedimento.