Dosagem de glicose

Bioquímica estrutural[pic 1]

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Dosagem de glicose

        A glicose é um monossacarídeo obtido pela hidrólise dos dissacarídeos e polissacarídeos. É absorvida do lúmen intestinal para as células e levada ao fígado pelo sistema porta. A glicose é metabolizada ou armazenada como glicogênio.

        A sua dosagem é indicada para avaliação do metabolismo dos carboidratos.

1. Métodos de dosagem:

a). Hexoquinase: considerada como método de referência para a dosagem de glicose, mas apresenta a desvantagem do alto custo.

b). Glicose-oxidase: apresenta baixo custo.

c). Orto-toluidina: os valores para este método são levemente mais altos que os métodos enzimáticos, pelo fato de outras monoses também reagirem. A sua principal desvantagem é a corrosividade do reagente aos equipamentos e também a sua toxicidade.

1. Tipos de amostra:

a). Plasma fluoretado: o fluoreto inibe a ação de enzimas glicolíticas das células sanguíneas.

b). Soro: desde que separado das células sanguíneas dentro de 30 min.

c). Urina de 24 horas: colhida com a adição de um conservante = 5 mL de ácido acético glacial. O método a ser utilizado para a dosagem é o da o-toluidina.

d). Líquor.

1. Metodologia: Glicose-oxidase:

A glicose oxidase catalisa a oxidação da Glicose de acordo com a seguinte reação:

        

Glicose + O2 + H2O                        Ácido Glucônico + H2O2[pic 2]

O peróxido de hidrogênio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol, sob ação catalisadora da peroxidase, através de uma reação oxidativa de acoplamento, formando uma antipirilquinonimina vermelha cuja intensidade de cor é proporcional à concentração da glicose na amostra.

                                        

2H2O2 + 4-Aminoantipirina + fenol                        Antipirilquinonimina + 4H2O[pic 3]

4. Reagentes:

1. Tampão-enzimas: Contém tampão fosfato 30 mmol/L; pH 7,5; glicose oxidase ≥12.500 U/L; peroxidase ≥800 U/L; 4-aminoantipirina ≥290 μmol/L; fenol ≥1 mmol/L;  azida sódica 7,5 mmol/L e surfactantes.
2. Solução - padrão: contém 100 mg/dL de glicose

5. Procedimento técnico:

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                                                  Branco                  Teste                Padrão

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Reagente de cor                         2,0 mL                    2,0 mL             2,0 mL

Solução padrão                             -                              -                  0,02mL

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