Quimioluminescência, Radioimunoensaio, Western blotting, Citometria de fluxo

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Imunologia Clínica

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ALUNO(A): GABRIELLI  – FA8N

ATIVIDADE PARA ENTREGA: Quimioluminescência, Radioimunoensaio, Western blotting, Citometria de fluxo

QUIMIOLUMINESCÊNCIA

Estudar sobre o método e responder as seguintes questões:

1. Descrever o princípio deste método.

Esse método se baseia na emissão de energia luminosa (em forma de luz) que foi gerada a partir de uma reação química, onde se o produto pesquisado na amostra estiver presente, irá ocorrer a reação e o reagente se transforma em um estado eletronicamente excitado, movendo o elétron da camada de valência, que ao retornar a um estado de energia menos excitado libera luz.

1. Cite vantagens e desvantagens deste método (2 vantagens e 2 desvantagens).

Vantagens: elevada sensibilidade, rapidez, automatização.

Desvantagens: reagente instável, limite de detecção é restringido devido a pureza de cada reagente.

1. Esta metodologia tem sido muito empregada nos laboratórios de análises clínicas, em substituição ao ELISA. Qual o motivo?

A quimiluminescência vem se destacando devido a sua sensibilidade elevada, mas em conjunto, também está sendo amplamente utilizada devido a possibilidade de automatizar o processo e assim diminuir a probabilidade de erros técnicos no manejo.

RADIOIMUNOENSAIO

Estudar sobre o método e responder as seguintes questões:

1. Descrever o princípio deste método.

O método se baseia na competição por um mesmo receptor entre uma substância a ser determinada e a mesma substância porem marcada radioisotopicamente.

1. Cite vantagens e desvantagens deste método (2 vantagens e 2 desvantagens).

Vantagens: baixo custo, rapidez, requer pouca amostra,

Desvantagens: instabilidade dos radioisótopos, risco operacional.

1. Esta metodologia tem sido SUBSTITUÍDA nos laboratórios de análises clínicas. Qual o motivo?

Essa técnica tem baixo custo porem requer uma preparação de equipe e necessidade de medidas especiais de biossegurança e descarte que possuem um custo elevado. Devido a isso, a produção de resíduos radioativos vem fazendo com que seja substituída por outras técnicas de resultados proporcionais, mas não oferecem esse risco.

CITOMETRIA DE FLUXO

Estudar sobre o método e responder as seguintes questões:

1. Descrever o princípio deste método.

Seu princípio basicamente baseia-se no emprego de uma radiação laser direcionada, que vai excitar substancias fluorescentes (ditas fluorocromos) presentes nas células. Ao ser excitado pela radiação do laser, o fluorocromo emite luz, que dependendo do comprimento de onda, possui uma cor característica. Os sistemas óticos (espelhos) e eletrônicos, coletam, filtram e convertem em pulsos elétricos os parâmetros de dispersão de luz e fluorescência emitidas. Em seguida os pulsos eletrônicos são convertidos em dados que possuem as informações físicas, químicas e biológicas de cada célula analisada, devido a intensidade de fluorescência e da luz dispersada.