Fitopatologia Fungos

A técnica de Microcultivo é utilizada no estudo de fungos filamentosos e

leveduriformes que permite a visualização de estruturas em arranjo natural, sem

contudo, destruir a arquitetura dos fungos no momento do crescimento.

1. OBJETIVO

- Aprender as técnicas de preparação de microcultivo em lâminas e em placa

de Petri.

2. MATERIAIS NECESSÁRIOS

 Colônias fúngicas;

 Placas de Petri esterilizadas confeccionadas com papel filtro, canudo e

lâmina;

 Placa com meio de cultura Àgar Sabouraud com antibiótico;

 Lamínulas esterilizadas;

 Palitos esterilizados para semeio;

 Becker com água sanitária para o descarte dos palitos;

 Pinça;

 Bisturi;

 Água destilada esterilizada;

 Lamparina;

 Lápis marcador para identificação.

AULA PRÁTICA: TÉCNICAS DE MICROCULTIVO

3. PROCEDIMENTO

3.1 Microcultivo em lâmina:

1) Perfurar o meio de cultura Ágar Sabouraud com bisturi ou estilete de forma a

obter um disco de meio;

2) Transferir com o bisturi/estilete o disco de meio para a lâmina contida no

interior de uma placa de Petri com papel filtro e canudo esterilizado;

3) Abrir a placa próxima à chama e transferir para o disco fragmentos da cultura

e cobrir com uma lamínula;

4) Umedecer o papel-filtro com água destilada esterilizada para obtenção de

uma atmosfera úmida durante a incubação;

5) Observar a presença de estruturas somáticas e reprodutivas em microscópio

após 7 dias.

3.2 Diretamente na placa com meio de cultura:

1) Retira-se um fragmento da cultura fúngica com o auxílio de uma alça ou

palito esterilizado, para ser semeado em placa de Petri com meio de cultura e

inocula o fungo em dois pontos equidistantes da placa;

2) Em seguida, após a inoculação na placa, é colocada uma lamínula

esterilizada sobre o material semeado;

3) Esperar o crescimento fúngico após 7 dias.