Preparo De Laminas Permanentes

I-INTRODUÇÃO:

Na observação microscopica existem laminas que serão ultilizadas por pouco periodo de tempo para este caso é uzado a tecnica de lamina a fresco. Existem tambem laminas que serão permanentes , é necessario aplicar tecnicas de preservação e estabilização para manter as estruturas celulares em bom estado, além de fornecer um material nitido e destacado, estas laminas permanentes são feitas para durar longos periodos de tempo, geralmente só são danificadas por motivos fatais como quedas e batidas.

II-OBJETIVOS:

Aprender a montar laminas permanentes, vizando seguir todos os passos com muito cuidado e atenção para que a lamina possa ter qualidade para a vizualização.

III-MATERIAIS E METODOS:

MATERIAIS:

-Material Biologico: Celulas da mucosa bucal

-Lamina

-Laminula

-fixador de Bouin

-Corantes: Hematoxilina e Eosina

-Alcool : 90%, 95% e 100%

-Xilol

-Resina

METODOS:

-Retirar as celulas da mucosa bucal forçando a buchecha para dentro com auxilio de um palito e fazer a raspagem formando um angulo de 45º, rapidamente fazer um esfregaço em lamina limpa deslizando em uma só direção de maneira que o material se espalhe e não se sobreponha.

-Apos o esfregaço, colocar em barquinhas antes que o material seque totalmente e mergulha-las em alcool 90% por 5 minutos.

-Lavar com agua destilada.

-Mergulhar em Hematoxilina por exatamente 5 minutos.

-Lavar com agua da torneira para retirar o excesso do corante presente.

-Corar com Eosina, por 3 minutos.

-Lavar ligeiramente com agua destilada.

-Desidratação: Passar o material por uma seção de alcoois:

Alcool 90%: 2 minutos

Alcool 95%: 2 minutos

Alcool 100% I: 2 minutos

Alcool 100% II: 2 minutos

-Diafanização: Passar por Xilol

Xilol I: 2 minutos

Xilol II: 2 minutos

-Retirar as laminas do xilol e rapidamente pingar uma gota de resina sobre o material. Cubrir com a laminula limpa evitando que se forme bolhas.

-Deixar em estufa a 37ºC, por alguns dias.

-Depois de seca, limpe a lamina e retire o excesso da resina.

-Observar em microscopio optico, no aumento de 400x.

IV-RESULTADOS:

Não foi possivel observar muitas celulas, pois não esfregou-se o suficiente a mucosa bucal porem, as celulas não se sobreporom e foi possivel observa-las individualmente entretanto estavam muito espalhadas e foi preciso procura-las, não houve muitas bolhas o corante se fixou em nucelo com coloração azul e citoplasma azul mais fraco, sendo possivel ver o limite celular.

V-DISCUSSÃO:

Resultados:

A-)

Fixação: É utilizada