Relatório de Enzimas
Por: Pedro Gabriel • 5/5/2015 • Trabalho acadêmico • 1.757 Palavras (8 Páginas) • 721 Visualizações
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UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA
INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE
DEPARTAMENTO DE BIOFUNÇÃO
BIOQUÍMICA APLICADA A NUTRIÇÃO I
DOCENTE: ALINE MIRANDA MASCARENHAS
DISCENTES: PEDRO GABRIEL
TÂMARA CERQUEIRA
Relatório de Bioquímica aplicada a Nutrição
Caracterização de Enzimas
Aula prática 3
SALVADOR
2015
- Introdução
Enzimas são proteínas com atividade catalítica. Elas aceleram reações termodinamicamente favorecidas. Os compostos transformáveis pela ação das enzimas recebem o nome de substrato. As enzimas são especificas em relação à reação que catalisam e exibem também um alto grau de especificidade em relação ao substrato. A velocidade de uma reação enzimática é função de diversos fatores, como: concentração de enzima, concentração de substrato, temperatura, pH, força iônica, etc.
- Objetivo
Observar a atividade da enzima catalase em diferentes condições: pH, temperatura, variação da concentração de enzima e substrato.
- Material e Métodos
- Água de alface (500 ml de água destilada + folhas de alface trituradas no liquidificador)
- H²O² 4%
- H²SO4 1N
- Solução albumina
- NaOH 1N
- Soluções tampão pH 4,5; 7,0; e 10,0
- Solução de cianeto de sódio (NaCN) a 1%
- Banho-maria
- EFEITO DA TEMPERATURA
- Preparar uma bateria com 3 tubos de ensaio, e enumerar.
- Fazer outra bateria de 3 tubos, cada um contendo 3,0 ml de água de alface. Distribuir estes tubos da seguinte maneira: TUBO 1 no congelador (0°), TUBO 2 à temperatura ambiente (30°) e TUBO 3 à 100°.
- TUBO N°1. Adicionar 1,0 ml de água oxigenada; 2,0 de água destilada; 6 gotas de solução de albumina e homogeneizar. Incubar a 0° por 10 minutos. Adicionar, cuidadosamente, 3,0 ml de água de alface, devendo a mesma já se encontrar na temperatura indicada. Homogeneizar por uma única inversão, tampando o tubo com parafilme. Esperar 10 minutos. Anotar o resultado na tabela.
- TUBO N°2. Adicionar 1,0 mL de água oxigenada; 2,0 mL de água destilada; 6 gotas de solução de albumina. Homogeneizar. Incubar a 30° (temperatura ambiente) por 10 minutos. Adicionar, cuidadosamente, 3,0 mL de água de alface, devendo a mesma já se encontrar na temperatura indicada. Homogeneizar por uma única inversão, tampando o tubo com parafilme. Esperar 10 minutos. Anotar o resultado na tabela.
- TUBO N°3. Adicionar 1,0 mL de água oxigenada; 2,0 mL de água destilada; 6 gotas de solução de albumina. Homogeneizar. Incubar a 100° por 10 minutos. Adicionar, cuidadosamente, 3,0 mL de água de alface, devendo a mesma já se encontrar na temperatura indicada. Homogeneizar por uma única inversão, tampando o tubo com parafilme. Esperar 10 minutos. Anotar o resultado na tabela.
- Construir um gráfico, analisando resultados.
Tubo | Água Oxigenada (mL) | Água destilada (mL) | Solução albumina (gotas) | Temperatura (°C) | Água de alface (mL) | Resultado (mm de espuma) |
1 | 1,0 | 2,0 | 6 | 0 | 3,0 | 5,7 |
2 | 1,0 | 2,0 | 6 | 30 | 3,0 | 4,2 |
3 | 1,0 | 2,0 | 6 | 100 | 3,0 | 0 |
- EFEITO DO pH
- Preparar uma bateria de 5 tubos de ensaio.
- Distribuir os reagentes como indicado na tabela abaixo, respeitando a ordem dos mesmos (da esquerda para a direita).
- Construir o gráfico, analisando os resultados.
Tubo | Água destilada (mL) | Tampão (2mL) | Ácido sulfúrico (gotas) | NaOH (gotas) | Água alface (ml) | Sol. Albumina | H²O² (mL) | Resultado (mm de espuma) |
1 | 2,0 | - | 2 | - | 3,0 | 6 | 1,0 | 0 |
2 | - | 4,5 | - | - | 3,0 | 6 | 1,0 | 0,5 |
3 | - | 7,0 | - | - | 3,0 | 6 | 1,0 | 7,5 |
4 | - | 10,0 | - | - | 3,0 | 6 | 1,0 | 10 |
5 | 2,0 | - | - | 2 | 3,0 | 6 | 1,0 | >10 |
- EFEITO DA CONCENTRAÇÃO DO SUBSTRATO
a) Distribuir os reagentes como indicado na tabela abaixo, respeitando a ordem dos mesmos (da esquerda para a direita).
b) Após a distribuição, homogeneizar os reagentes por uma única inversão, tampando os tubos. Esperar 10 minutos e anotar o resultado (em mm de espuma formada a partir da superfície do líquido). Anotar o resultado na tabela.
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