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Relatório de Enzimas

Por:   •  5/5/2015  •  Trabalho acadêmico  •  1.757 Palavras (8 Páginas)  •  721 Visualizações

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UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA

INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE

DEPARTAMENTO DE BIOFUNÇÃO

BIOQUÍMICA APLICADA A NUTRIÇÃO I

DOCENTE: ALINE MIRANDA MASCARENHAS

DISCENTES: PEDRO GABRIEL

TÂMARA CERQUEIRA

    Relatório de Bioquímica aplicada a Nutrição

                         

    Caracterização de Enzimas
Aula prática 3

SALVADOR
2015

  1. Introdução

Enzimas são proteínas com atividade catalítica. Elas aceleram reações termodinamicamente favorecidas. Os compostos transformáveis pela ação das enzimas recebem o nome de substrato. As enzimas são especificas em relação à reação que catalisam e exibem também um alto grau de especificidade em relação ao substrato. A velocidade de uma reação enzimática é função de diversos fatores, como: concentração de enzima, concentração de substrato, temperatura, pH, força iônica, etc.

  1. Objetivo

Observar a atividade da enzima catalase em diferentes condições: pH, temperatura, variação da concentração de enzima e substrato.

  1. Material e Métodos

- Água de alface (500 ml de água destilada + folhas de alface trituradas no liquidificador)

- H²O² 4%

- H²SO4 1N

- Solução albumina

- NaOH 1N

- Soluções tampão pH 4,5; 7,0; e 10,0

- Solução de cianeto de sódio (NaCN) a 1%

- Banho-maria

  1. EFEITO DA TEMPERATURA

  1. Preparar uma bateria com 3 tubos de ensaio, e enumerar.
  2. Fazer outra bateria de 3 tubos, cada um contendo 3,0 ml de água de alface. Distribuir estes tubos da seguinte maneira: TUBO 1 no congelador (0°), TUBO 2 à temperatura ambiente (30°) e TUBO 3 à 100°.
  3. TUBO N°1. Adicionar 1,0 ml de água oxigenada; 2,0 de água destilada; 6 gotas de solução de albumina e homogeneizar. Incubar a 0° por 10 minutos. Adicionar, cuidadosamente, 3,0 ml de água de alface, devendo a mesma já se encontrar na temperatura indicada. Homogeneizar por uma única inversão, tampando o tubo com parafilme. Esperar 10 minutos. Anotar o resultado na tabela.
  4. TUBO N°2. Adicionar 1,0 mL de água oxigenada; 2,0 mL de água destilada; 6 gotas de solução de albumina. Homogeneizar. Incubar a 30° (temperatura ambiente) por 10 minutos. Adicionar, cuidadosamente, 3,0 mL de água de alface, devendo a mesma já se encontrar na temperatura indicada. Homogeneizar por uma única inversão, tampando o tubo com parafilme. Esperar 10 minutos. Anotar o resultado na tabela.
  5. TUBO N°3. Adicionar 1,0 mL de água oxigenada; 2,0 mL de água destilada; 6 gotas de solução de albumina. Homogeneizar. Incubar a 100° por 10 minutos. Adicionar, cuidadosamente, 3,0 mL de água de alface, devendo a mesma já se encontrar na temperatura indicada. Homogeneizar por uma única inversão, tampando o tubo com parafilme. Esperar 10 minutos. Anotar o resultado na tabela.
  6. Construir um gráfico, analisando resultados.

Tubo

Água Oxigenada (mL)

Água destilada (mL)

Solução albumina (gotas)

Temperatura (°C)

Água de alface (mL)

Resultado (mm de espuma)

1

1,0

2,0

6

0

3,0

5,7

2

1,0

2,0

6

30

3,0

4,2

3

1,0

2,0

6

100

3,0

0

  1. EFEITO DO pH
  1. Preparar uma bateria de 5 tubos de ensaio.
  2. Distribuir os reagentes como indicado na tabela abaixo, respeitando a ordem dos mesmos (da esquerda para a direita).
  3. Construir o gráfico, analisando os resultados.

Tubo

Água destilada (mL)

Tampão (2mL)

Ácido sulfúrico (gotas)

NaOH (gotas)

Água alface (ml)

Sol. Albumina

H²O² (mL)

Resultado (mm de espuma)

1

2,0

-

2

-

3,0

6

1,0

0

2

-

4,5

-

-

3,0

6

1,0

0,5

3

-

7,0

-

-

3,0

6

1,0

7,5

4

-

10,0

-

-

3,0

6

1,0

10

5

2,0

-

-

2

3,0

6

1,0

>10

  1. EFEITO DA CONCENTRAÇÃO DO SUBSTRATO

a) Distribuir os reagentes como indicado na tabela abaixo, respeitando a ordem dos mesmos (da esquerda para a direita).

b) Após a distribuição, homogeneizar os reagentes por uma única inversão, tampando os tubos. Esperar 10 minutos e anotar o resultado (em mm de espuma formada a partir da superfície do líquido). Anotar o resultado na tabela.

...

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