Extração de DNA

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FACULDADE ANHANGUERA

DIANDERSON DE SOUSA                                                                R.A: 1598852562

FERNANDO JOSÉ FAORO GASPARRINI                                        R.A: 2485815413

JACIANE FREIRE SANTANA                                                           R.A: 1575173905

AGRONOMIA

AULA PRÁTICA DE BIOLOGIA CELULAR:

EXTRAÇÃO DO ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (DNA) DAS CELULAS DE FRAGARIA SP

RONDONÓPOLIS

05/2015

1. INTRODUÇÃO

O intuito desse relatório é mostrar na prática como proceder para preparação, e seguimento do procedimento para extração das fitas de DNA que estão contidas no núcleo de uma célula eucarionte vegetal, utilizando o método de maceração e destruição das membranas, assim como a precipitação do material genético através de líquidos com diferentes densidades.

 

2. OBJETIVOS

Após o estudo em sala de aula das características, funções e particularidades da organela chamada de núcleo das células eucarionte, partimos então para a prática, fazendo a preparação adequada do material que utilizaríamos para a visualização das fitas de DNA contidas no interior do núcleo.

 Para tal atividade desenvolvida em laboratório estudamos um tipo de célula vegetal.

• Célula Eucarionte pluricelular – FRAGARIA SP (Morango)

 

Entendendo teoricamente quais as funções da organela que contém todo o material genético de uma célula fizemos o procedimento através da orientação da professora Márcia Stucki.

 

3. MATERIAL E MÉTODOS

3.1 Materiais utilizados.

Foi utilizado para visualização do material genético dentro do laboratório, os seguintes materiais e equipamentos:

Equipamentos

• Pipeta de 5 ml;
• Pipetador;
• Almofariz;
• Pistilo;
• Becker de 80 ml;
• Becker de 250 ml;
• Bastão de vidro;
• Tubo de ensaio;
• Suporte para tubo de ensaio;
• Proveta de 25 ml;
• Estilete.

Materiais

• Álcool etílico;
• Detergente Neutro – 10 ml
• Água – 60 ml
• Cloreto de sódio – 20 g
• Morangos – 3 unidades

3.2 Métodos

Para realização da atividade seguimos o seguinte procedimentos e preparação dos materiais que utilizaríamos.

Etapa 01 – Preparar solução de LISE

1. Misturar 10 ml de detergente neutro com NaCl no Becker de 80 ml, mexendo e homogeneizando com um bastão de vidro.

1. 60 ml de água + 20 g de NaCl.

Etapa 02 – Extração do ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLEICO

1. No almofariz retirar o cortar e macerar os morangos (Fragaria Sp) com o pistilo juntamente com a solução de lise.
2. Incubar em temperatura ambiente por 10 minutos a solução já macerada, mexer 3 vezes durante esse tempo;
3. Colocar uma peneira sobre o Becker de 250 ml e passar a mistura para retirada para separação das partes solidas;
4. Colocar o material já separado em um tubo de ensaio;
5. Despejar lentamente pela parede do tubo de ensaio o álcool etílico com auxílio da pipeta de 5 ml;
6. Aguardar 3 minutos.

4. RESULTADOS E DISCUSSÃO

        Após seguido os passos do procedimento e aguardados os 3 minutos necessário, percebemos que quando a solução se matem parada, acontece a separação do material genético que estão contidos nos materiais.

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