Validação De Metodologia Analitica

• VALIDAÇÃO DE METODOLOGIA ANALÍTICA

• Para que novos ou revisão de métodos analíticos sejam submetidos ao comitê de revisão da USP os mesmos deverão ser encaminhados com informações suficientes relativas:

- Razão: identificação da necessidade do método, descrição da sua capacidade e o porque da preferência sobre outros tipos de determinação, para revisão deverá ser feita uma comparação mostrando as limitações do método oficial corrente e vantagens do método revisado.

- Procedimento analítico proposto: descrição completa do método analítico suficientemente detalhada para possibilitar a sua execução, indicação dos parâmetros operacionais e instruções específicas como preparo de reagentes, desempenho conveniente dos testes, descrição dos brancos usados, precauções e fórmulas para cálculos dos resultados dos testes.

- Dados: completa documentação da validação do método analítico, deverá incluir dados experimentais e cálculos de cada parâmetro do desempenho analítico aplicado. Os parâmetros analíticos típicos empregados em validação de métodos são:

. exatidão (accuracy)

. precisão (precision)

. especificidade (specificity)

. limite de detecção ( detection limit )

. limite de quantificação ( quantitation limit)

. linearidade e intervalo (linearity and range)

. resistência (ruggedness)

. robustez (robustness)

• Conceito: validação de método analítico é o ato documentado pelo qual é determinado, através de estudos de laboratório, os parâmetros de desempenho analítico do método que devem atender as exigências desejadas garantindo sua eficiência.

• Importância:

- garantir que os resultados obtidos reflitam a operação dos procedimentos analíticos,

- fornecer informações confiáveis,

- assegurar uniformidade, reprodutibilidade e qualidade do método,

- reduzir a incidência de desvios do método,

- diminuir a perda financeira,

- indicar qualidade uma vez que faz parte integral de CQ,

- é documentação exigida pela legislação e necessária para comprovação de que o método é adequado e apto para o uso desejado.

• FDA – 21CRF (código de regulação federal) (R340 E79C)

- Seção 211.165 (e): a exatidão, sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade dos métodos de análise empregados pela empresa deverão ser estabelecidos e documentados.

- Seção 211.166 (e.3): o programa escrito deverá ser seguido e deverá incluir métodos de análise confiável, significativo e específico.

- Seção 211.166 (ª2): a documentação deverá incluir a localização de valores que estabelece que o método usado na avaliação da amostra possui padrões corretos de exatidão e confiança quando aplicado ao produto testado.

EXATIDÃO

• Definição = grau de concordância entre os resultados encontrados pelo método e um valor aceito como referência (valor real).

• Determinação = aplicar o método em amostras de pureza conhecida (padrão de referência),

= comparar os resultados do método em questão com os de um método validado.

• Expressão = como porcentagem de recuperação de uma quantidade conhecida adicionada na amostra.

R% = [(CF – CNF)] x 100 / CA

• Alíquotas = recomenda-se no mínimo 3 concentrações e 3 replicatas de cada perfazendo 9 determinações no mínimo.

PRECISÃO

• Definição = é o grau de concordância entre os resultados individuais quando a técnica é aplicada em diversas alíquotas de uma mesma amostra homogênea em idênticas condições de testes, indica a reprodutibilidade do método.

• Determinação = realizar o doseamento pelo método a validar em um nº suficiente de alíquotas de uma mesma amostra homogênea e fazer tratamento estatístico dos resultados.

• Expressão = desvio padrão

= coeficiente de variação (desvio padrão relativo).

CV = desvio padrão x 100

Teor

• Alíquotas = 3 concentrações e 3 replicatas ou mínimo de 6 determinações de 100% da concentração do teste.

ESPECIFICIDADE

• Definição = capacidade que um método tem de avaliar de forma inequívoca a substância em exame na presença de componentes (impurezas, produtos de degradação etc) que poderiam interferir na sua determinação numa mistura.

• Determinação = mostrar que o procedimento não é afetado pela presença de impurezas e excipientes adicionado-os em níveis apropriados.

• Expressão = porcentagem de concordância.

%C = TP x 100