A EXTRAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE POLISSACARÍDEOS

1 - INTRODUÇÃO

        Os carboidratos são as moléculas orgânicas mais abundantes da natureza, os quais constituem ¾ da massa de todas as plantas (grãos, verduras, hortaliças). Seu armazenamento de energia é dado através de suas ligações químicas, sendo classificados em  monossacarídeos, oligossacarídeos e polissacarídeos.

Os polissacarídeos, também chamados de glicanos, são carboidratos que possuem vários monômeros de carboidratos ligados entre si. Dentro deste grupo, há dois tipos de polissacarídeos, que podem podem ser lineares ou ramificados, os homopolissacarídeos que possuem apenas uma espécie monomérica e os heteropolissacarídeos, que possuem dois ou mais tipos diferentes.[1]

Figura 1: Representação ilustrativa de homopolissacarídeos e heteropolissacarídeos.

[pic 1]

Fonte: Princípios de Bioquímica, 4ª. Edição.

Este grupo se encontra amplamente distribuído na natureza, além de possuir uma grande importância devido ao fato de desempenhar funções como:

• Materiais estruturais (encontrados na celulose, hemicelulose, pectina e quitina);
• Substâncias de reservas (encontrados principalmente no amido e no glicogênio);
• Substâncias capazes de reter água (encontrados nos vegetais, como ágar, pectinas e alginatos).

Além do mais, os polissacarídeos de menor peso molecular são na sua maioria solúveis em água, de modo que esta solubilidade diminui com o aumento deste peso, acarretando uma hidrolização de forma parcial ou total através de ácidos ou enzimas, a qual resulta em oligossacarídeos e monossacarídeos. Desta forma, a análise realizada por esses resíduos podem fornecer informações sobre a sequência e posições dos monossacarídeos, assim como as ligações entre eles.

2 - OBJETIVOS

        A presente prática experimental tem como objetivo principal demonstrar a extração e caracterização de polissacarídeos de materiais biológicos: amido de batata e glicogênio do fígado. Por conseguinte, esses polissacarídeos vão ser identificados e evidenciados através de reações de coloração e precipitação.

 

3 - PARTE EXPERIMENTAL

   3.1 - Materiais e Reagentes

     3.1.1 - Materiais

• Béquer 50 mL;
• Béquer 250 mL;
• Béquer 500 mL;
• Espátula;
• Pisseta;
• Bastão de vidro;
• Funil de vidro;
• Suporte universal para funil;
• Erlenmeyer 125 mL;
• Gaze;
• Pipeta de Pasteur;
• Placa de petri;
• Batata;
• Bico de Bunsen;
• Tripé;
• Tela de amianto;
• Tubo de ensaio médio;
• Tubo de ensaio grande;
• Tubo para centrifugação;
• Suporte para tubo de ensaio;
• Suporte para pipeta;
• Papel de filtro;
• Fígado de boi;
• Balança analítica;
• Proveta 100 mL;
• Banho de gelo;
• Pinça de madeira;
• Centrífuga;
• Cronômetro;
• Pipeta 1 mL;
• Pipeta 5 mL;
• Pipeta 10 mL.

     3.1.2 - Reagentes

• Água destilada;
• Ácido sulfúrico concentrado;
• Solução de fenol 5%;
• Solução de lugol;
• Solução saturada de sulfato de amônio;
• Álcool etílico absoluto;
• Hidróxido de potássio 5 M;
• Solução de glicogênio a 1 mg/mL;
• Solução de amido.

   3.2 - Toxicidade

     3.2.1 - Água destilada [2]

[pic 2]

O produto não é irritante para a pele, além de ser atóxico quando em contato com os olhos e para uma possível ingestão. Por ser considerado um produto atóxico, não é necessário cuidados preventivos e nem cuidados de manuseio. Materiais ou substâncias incompatíveis: Não possui.

     3.2.2 - Ácido sulfúrico  [3]

[pic 3]

Irritante para a pele, mucosa, olhos e trato respiratório podendo causar edema agudo no pulmão. O produto deve ser mantido em embalagens bem fechadas, local seco, limpo e a temperatura ambiente. Materiais ou substâncias incompatíveis: Água, metais alcalinos, compostos de metais alcalinos, amoníaco, metais alcalino-terrosos, soluções de hidróxidos alcalinos.

     3.2.3 - Fenol  [4]

[pic 4]

O produto é tóxico quando inalado, de forma que quando o mesmo está em altas concentrações é extremamente corrosivo, podendo causar queimaduras severas, além de ser severamente irritante para os olhos, pele e vias respiratórias. Este produto deve ser mantido em embalagens bem fechadas, em local seco, limpo e a temperatura ambiente. Materiais ou substâncias incompatíveis: Aldeídos, nitratos e nitritos.

     3.2.4 - Sulfato de amônio [5]

[pic 5]

Devido a suscetibilidade das pessoas, o produto pode causar irritação aos olhos, nariz e garganta. O produto deve ser armazenado, preferencialmente, em área coberta, seca, ventilada, piso impermeável e afastado de materiais incompatíveis. Materiais ou substâncias incompatíveis: Álcalis, Ácidos fortes, cobre e suas misturas.

     3.2.5 - Álcool etílico absoluto [6]

[pic 6]

O produto pode causar dor de cabeça e sonolência, no entanto, em caso de ingestão pode acarretar em alucinações visuais, embriaguez e torpe. Este produto deve ser mantido em embalagens bem fechadas, local seco, limpo, longe de fontes de ignição e a uma temperatura ambiente. Materiais ou substâncias incompatíveis: Metais alcalinos e oxidantes fortes.

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