DETERMINAÇÃO DE LACTOSE

mmm- PROCEDIMENTO

1. transferir 10 mL (pipeta volumétrica) de leite para um tubo de ensaio;

2. aquecer a 45ºC para ativar a enzima

3. adicionar, pela parede do tubo de ensaio, 2 mL de solução de guaiacol e 2 a 3 gotas de água oxigenada;

4. em presença de peroxidase desenvolve-se uma coloração salmão.

5 – DETERMINAÇÃO DE LACTOSE

5.1. - FUNDAMENTO

A amostra deve ser previamente preparada para a determinação do teor de lactose no leite. Para isso deve ser realizada uma precipitação das proteínas do leite com sulfato de zinco a 15% e hidróxido de sódio 0,75 Mol/L. Esse procedimento resulta também na adsorção de gordura do leite ao precipitado de proteínas. Após a filtração obtém-se o soro clarificado contendo a lactose a ser analisada.

A cloramina T reage com a água liberando o NaOCl (hipoclorito de sódio) que é oxidante.

O hipoclorito de sódio vai oxidar o KI presente produzindo KIO (hipoiodito de potássio)

NaOCl + KI  KIO + NaCl

O KIO é altamente oxidante e reage com a lactose (açúcar redutor), resultando em sua forma ácida.

Na-N-Cl

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O = S=O

|

+ H2O

NH2

|

O = S=O

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+ NaOCl

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CH3

|

CH3

20

KIO + RCHO  RCOOH + KI + KIO

(lactose) (forma ácida) (excesso)

Como no método utiliza - se um excesso de iodeto de potássio e cloramina T, forma-se um excesso de KIO. O KIO restante, em meio ácido vai reagir com o KI restante, libertando I2.

KIO + KI + 2 HCl  2 KCl + I2 + H2O

(excesso)

O iodo molecular é titulado com o tiossulfato de sódio.

I2 + 2Na2S2O3  2 NaI + Na2S4O6



cora o amido azul

5.2. - MATERIAL

 pipeta volumétrica de 25 mL