Determinação Do Teor De sólidos Solúveis No Caldo Da Cana-de-açúcar

Assunto: Curva de calibração para determinação colorimétrica de açucares redutores pela técnica de Somogy & Nélson.

1. Princípio do método:

Através de uma série de diluições de uma solução padrão de concentração conhecida, é possível estabelecer uma curva de calibração para métodos colorimétricos, que relacione a concentração de açúcares redutores com valores de transmitâncias.

Como a concentração de açúcares redutores é expressa em termos de concentração de glicose, parte-se de uma solução padrão de glicose, realizando-se uma série de diluições, de forma a produzir novas soluções cujos valores de suas concentrações estejam compreendidos em uma faixa previamente determinada.

A determinação da faixa de concentração na qual o método se aplica é feita segundo dois critérios:

1- Deve existir uma correlação linear entre a concentração e o logaritmo da transmitância e;

2- Os valores das transmitâncias obtidas devem estar situados na região de maior sensibilidade do espectrofotômetro utilizado.

2. Soluções de Uso:

• Solução de Glicose - Padrão

• Reagente de Somogy

• Reagente de Nélson

3. Obtenção da Curva de Calibração:

À partir da concentração da solução padrão com 2g/L de glicose realizar as diluições com conjuntos de pipetas e balões volumétricos adequados, conforme Tabela I.

2,0g glicose anidra ________________ 1000 ml H2O destilada

10 ml da solução __________________ 100 ml H2O destilada

Obtenção da curva

Laboratório Geral do Setor de Açúcar e Álcool - LGAA

Departamento de Agroindústria, Alimento e Nutrição – ESALQ -USP

Procedimento Operacional Padronizado

POP N° 5.1 - LGAA Revisão: 16/03/2006 Página 02 de 03

Tabela I – Construção da Curva de Calibração:

Obs: Utilizar tubo graduado de 25 ml

4. Procedimento:

• Adicionar a cada tubo 2,0 (dois) ml do Reagente de Somogy;

• Homogeneizar bem;

• Colocar os tubos de ensaio em banho-maria em ebulição por 10 (dez) minutos;

• Após este tempo, resfriar os tubos em água corrente até temperatura ambiente;

• Adicionar a cada tubo 2,0 (dois) ml do Reagente de Nélson;

• Homogeneizar bem;

• Completar o volume dos tubos à marca de aferição com água destilada;