O Cultivo Bacteriano
Por: ectry.com • 2/11/2022 • Ensaio • 256 Palavras (2 Páginas) • 118 Visualizações
Cultivo bacteriano
- Limpar o fluxo laminar e ligar a ultravioleta – 20 min
- Todo material que for levado ao fluxo deve ser limpo (externamente) com álcool 70%
- Proceder o repique celular
- Materiais a levar para o fluxo: alças microbianas, meio de cultura, caneta retroprojetor, microrganismo p/ ser usado e um descarte.
- Nesse primeiro momento, o meio de cultivo já está pronto.
- Esgotamento – 4 áreas.
- Por fim, incubar células na estufa. A incubação será feita em jarra de anaerobiose juntamente com um sistema gerador de atmosfera anaeróbia (Aerobacter 16 TT- Probac) a 37oC por período de 7 – 14 dias.
- Colocar as alças no descarte com água sanitária, por 15min para depois lavar com água e sabão e colocar para esterilizar.
- O meio utilizado é o Agar Sangue que deve ser suplementado hemina (5 μg/mL) e menadiona (1 μg/mL) (vitamina k)(Sigma).
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- Todas as colônias isoladas, de acordo com suas características macroscópicas, serão
submetidas à caracterização por afinidade tintorial pela técnica de Gram e definição de morfologia por
microscopia óptica. As colônias serão repicadas em caldo Triptose soja suplementados com hemina (5
μg/mL) e menadiona (1 μg/mL) (Sigma) e com adição de óleo mineral com objetivo de impedir a difusão
de oxigênio seguido de incubação em jarra de anaerobiose juntamente com um sistema gerador de
atmosfera anaeróbia (Aerobacter 16 TT- Probac) a 37o C por período de 7 – 14 dias após o qual as
células serão centrifugadas e estocadas em solução crioprotetora a – 80oC.
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