O Relatório Extração de DNA

Biomedicina - 3° semestre / manhã

Aula prática n°1 - Extração de ácidos nucléicos

MATERIAIS UTILIZADOS

• Banana
• Sal
• Detergente
• Água quente
• Colher de sopa
• 2 Béqueres
• Proveta de 10 ml
• Corante (azul de metileno)
• Bastão de vidro
• Placa de vidro
• Álcool gelado
• Água

OBJETIVO

• Extrair o DNA de diferentes frutas e da mucosa oral;
• Observar e discutir os resultados;
• Elaborar um relatório por bancada.

PROCEDIMENTO 1

• Amassar a banana na placa de vidro;
• Adicionar no Becker 100 ml de uma solução de 80 ml de água quente + 20 ml de detergente + 1 colher (chá) de sal;
• Esperar 10 minutos e então colocar o Becker onde está a fruta + solução em um banho de gelo, à medida que a solução esfria é possível observar que o líquido parece estar “talhando”;
• Quando a solução estiver fria coar e separar em um frasco limpo;
• Inclinar o vidro com o líquido coado e derramar vagarosamente pela parede do vidro o álcool gelado;
• Com o bastão de vidro tentar “pescar” os ácidos nucléicos.    

[pic 1]   [pic 2] 

Fotos tiradas durante a aula de Biologia Molecular no dia 25/02/2019

PROCEDIMENTO 2:

• Solução de extração: 1 copo com água limpa + 2 pitadas de sal + 5 ml d e detergente (adicionado posteriormente)
• Extração: fazer bochecho com água e sal por cerca de 2 minutos, em seguida derramar o bochecho no Becker. Colocar aproximadamente 3 ml na proveta de 10 ml, adicionar 5 ml de detergente, misturar suavemente e adicionar o álcool gelado. Pingar 1 gota de corante e aguardar 5 minutos.

RESULTADO 1

Após a realização do procedimento o DNA da banana foi separado do restante da solução, ficando concentrado em uma camada superficial, com aspecto de “fiapos” de algodão.

 

RESULTADO 2

Após a realização do procedimento, o DNA nesse ccaso também ficou isolado na camada superficial do recipiente com o mesmo aspecto, entretanto a quantidade se diferenciou bastante, sendo que nesse procedimento a quantidade de DNA na superfície foi bem menor.

[pic 3]  [pic 4]

Fotos tiradas na aula de laboratório do dia 25/02/2019.(fotos do resultado do Procedimento 1)

[pic 5]

Foto tirada na aula de laboratório do dia 25/02/2019.(foto do resultado do Procedimento 2)

QUESTÕES

1. Onde o DNA está presente e como podemos isola-lo?

O DNA está presente no núcleo das células, dentro dos cromossomos, e podemos isola-lo separando dos outros componentes celulares.

1. Por que o material precisa ser macerado para isolar o DNA?

Para que no caso das células vegetais, seja rompida a parede celular que é uma estrutura espessa e resistente, e também aumentar a superfície de contato entre a solução e as células.

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