PRATICA 6: TÉCNICAS DE QUANTIFICAÇÃO DE MICRORGANISMOS

UNIBH - BIOMEDICINA

Bárbara do Carmo

Júlia Ribeiro

Francielle Dias

Ianca Lorrayne

PRATICA 6: TÉCNICAS DE QUANTIFICAÇÃO DE MICRORGANISMOS

Urocultura, cultura de alimentos e água

Belo Horizonte 2016

INTRODUÇÃO

Além da identificação do tipo do microrganismo de um meio, também é importante em alguns casos sua quantificação. Como exemplo de casos em que a quantificação de microrganismos torna-se importante, pode-se citar: quantificação da população de microrganismos da água e alimentos para avaliar a qualidade microbiológica dos mesmos, na análise da eficiência de agentes antimicrobianos ou a eficácia de práticas higiênico sanitárias para se verificar a população sobrevivente ao tratamento. E, a várias técnicas de contagem de microrganismos.

Assim, os microrganismos podem ser quantificados de forma direta, contando-se microscopicamente o número de células presentes num determinado material ou superfície, ou indiretamente, efetuando-se análises da turbidez, determinação do peso seco, concentração de substâncias químicas (proteínas, pesquisa de determinada enzima ou produto final de uma via metabólica, DNA, RNA) ou através da contagem do número de microrganismos viáveis utilizando um meio de cultura apropriado.

MATERIAL

• Tubo contendo água
• Placas de Petri estéreis
• Tubos com salina estéril
• Pipetas estéreis
• Tubos com água simples fundido e resfriado a 56ºC
• Lâmina para microscopia
• Reagentes para realizar Gram

EXECUÇÃO

• Preparou se um esfregaço fino a partir de uma alça de urina e foi feito a coloração pelo método de Gram;
• Fizemos diluições sucessivas da amostra e semeadura por incorporação em ágar simples;
• Marcamos duas placas estéreis vazias: 10-3 e 10-5;
• Marcamos cinco tubos contendo 9ml de solução salina (10-1 a 10-5);
• Homogeneizamos a água com pipeta estéril, transferindo 1ml para o tubo de salina marcado 10-1;
• Com a mesma pipeta, homogeneizamos o conteúdo do tubo 10-1, transferindo 1 ml para o tubo 1 de salina marcado 10-2;
• Com a mesma pipeta repetimos esse procedimento até o tubo marcado 10-5;
• Com uma segunda pipeta estéril, homogeneizamos o conteúdo dos tubos 10-3 e 10-5 e transferimos 0,5ml para as placas correspondentes;

RESULTADOS

Fizemos a contagem das placas e obtivemos os seguintes resultados:

Placa 10-3:   107 x 103
= 10,7 x 104 uFc/ ml de água[pic 1]

[pic 2]

[pic 3]

Placa 10-1:  150 x 101
= 15,0 x 102 uFc/ ml de água[pic 4]

E o resultado do Gram foi o seguinte:

Bactérias gram +, com morfologia de cocos, streptococos e stafilococos.

CONCLUSÃO

Após a realização da prática podemos perceber o quanto é importante fazer a quantificação de microrganismos, já que é um importante parâmetro de qualidade utilizado em indústrias de alimentos, de cosméticos entre outras.

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