Coloracao De Gran

Introdução

A Coloração de Gram é um método criado por Christian Gram para identificar e classificar as bactérias de acordo com a espessura da parede celular e sua coloração.

Na aula prática foi realizado o experimento de coloração de Gram utilizando as metologias: esfregaço, fixação, coloração, descoloração e secagem.

Materiais Utilizados

- 2 lâminas de vidro;

- 2 placas de bactérias:

1. Pink – Agar Mac Conkey;

2. Vermelha – Agar Sangue.

- Alça Bacteriológica;

- Bico de Bunsen;

- Solução salina 20 %;

- Óleo de imersão;

- Corante cristal violeta;

- Lugol;

- Álcool Cetona;

- Fucsina;

- Microscópio.

Experimento

Foi feita a identificação das laminas com as siglas MC e AS, onde MC significa Mac Conkey e AS significa Agar Sangue.

Foi acendido o bico de Bunsen para a esterilização da alça bacteriológica que sera usada para as coletas das bactérias.

Nas lâminas foi inserido uma pequena quantidade de solução salina 20%.

Com a extremidade da alça bacteriológica foi feita a coleta da bactéria de cada placa sendo que entre cada coleta foi realizado uma nova esterilização.

Após cada coleta foi realizado o esfregaço das bactérias nas soluções salinas 20% para homogeneizar a solução e bactéria.

As lâminas foram passadas sobre a chama do bico de Bunsen para realizar a etapa de fixação das bactérias.

Sobre as duas lâminas foram seguidos os seguintes passos:

- Aplicação de algumas gotas do corante cristal violeta, após um minuto a retirada de excesso;

- Aplicação de algumas gotas do Lugol, após um minuto a retirada do excesso;

- Logo após a retirada do exceso dos materiais corante cristal violeta e Lugol foi realizada a etapa de descoloração, onde foi aplicada 3 gotas de álcool cetona uma de cada vez até a parcial remoção do corante;

- Retirou-se o excesso de substâncias das com um pouco de água;

-Por último foi aplicada a fucsina, após trinta segundos foi retirado o excesso;

- Com um papel toalha as lâminas foram secadas com o máximo cuidado.

Resultado

As lâminas foram colocadas no microscópio com uma gota de óleo de imersão, a lente que foi utilizada para a observação estava com o aumento máximo.

Foi observados na lamina MC bactérias gram negativas (com a coloração rosa)e a morfologia de bacilos.

Imagem 1: Imagem similar a que foi vista pelo grupo

Fonte Google

Na segunda lâmina foram observados cocos de coloração rosa, nesta lâmina ocorreu um erro na etapa de descoloração pelo excesso de álcool cetona, ja que o resultado esperado eram cocos gram positivos (com coloração roxa).

Imagem 2: Imagem similar a que foi vista pelo grupo Imagem 3: Imagem esperada ser vista pelo grupo

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