Materiais e métodos de Experimento com Drosophila melanogaster

MATERIAIS E MÉTODOS:

Frascos de cultura de 250 ml com tampa de algodão

Eterizador

Re-eterizador

Pincel

Lupa

Estilete

Fêmeas virgens da linhagem mutante e da linhagem selvagem

Machos da linhagem mutante e da linhagem selvagem

Meio de cultura

-12g de ágar

-1300mL de água

-100g de mel

-120g de fubá

-30ml de nipagina a 10% (antifúngico)

Modo de preparo: Ferveu-se 1.000ml de água. Dissolveu-se o fubá e o ágar nos 300ml de

água restantes e em seguida juntou-os com a água fervente. Ferveu-se a mistura por 10

minutos. Adicionou-se o mel e o antifúngico e ferveu-se por mais 5 minutos. Em frascos de

boca larga esterilizados, distribui-se uma camada de aproximadamente 1,5cm de espessura

do meio de cultura ainda quente. Vedou-se as bocas dos frascos com a rolha de algodão e

guardou-se à temperatura ambiente em local seco e escuro. No dia da sua utilização

acrescentou-se algumas gotas de uma solução contendo água e fermento biólogico.

Metodologia: No início do experimento foi feito o cruzamento recíproco das moscas

parentais. No frasco 1 cruzou-se aproximadamente 10 machos mutantes (ebony) e 10 fêmeas

selvagens; já no frasco 2, aproximadamente 10 machos selvagens e 10 fêmeas mutantes

(ebony).

Ao surgirem as primeiras larvas foi preciso adicionar algumas gotas de fermento biológico ao

meio de cultura que servira para alimentar as larvas e as moscas adultas. A adição de mais

gotas de fermento se fez necessária sempre que o meio de cultura estivera secando. Dois dias

após o aparecimento das primeiras pupas, os parentais foram descartados. Todas as moscas

F1 que surgiram dentro de 10 dias foram imobilizadas e observadas na lupa e anotado a

quantidade, o sexo e o fenótipo dos indivíduos (observou-se se o fenótipo mutante ou

selvagem estava associado ao sexo).

Deve-se analisar um número mínimo de 100 moscas F1. No início dos nascimentos das

moscas F1 deve-se