Meio de cultura para criação de drosófilas

UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE

INSTITUTO  DE BIOLOGIA

DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MARINHA

GENÉTICA I

Prof. Carlos Alberto C. Andrade

Meio de cultura para criação de drosófilas

        Algumas espécies de Drosophila podem ser criadas a partir de meio simples. É tarefa relativamente fácil elaborar o meio de cultura e distribuí-lo em garrafas ou pequenos tubos. Com este preparo a manipulação, cruzamentos e manutenção dos estoques ficam resolvidos. Só para dar uma idéia da importância deste procedimento: pode-se criar mosca com garrafa e banana, mas torna-se inviável manipular e fazer cruzamentos com ela. Tente, por exemplo, virar de cabeça para baixo uma garrafa contendo apenas banana. Tal ato esmagará todas as moscas. Isto já não acontece com a  garrafa pronta, a qual pode ficar em pé, deitada ou de cabeça para baixo sem problemas de cair o meio.

        O propósito desta aula é fazer o meio de cultura da mosca Drosophila melanogaster. Este procedimento será acompanhado de esterilização das garrafas e/ou tubos e rolhas.

Materiais e Métodos

Antes de fazer o meio de cultura é necessário esterilizar garrafas e tubos. Coloque água na panela de pressão (dois dedos de altura) e, em seguida, adicione as garrafas e tubos com rolhas ambos com água dentro (mais ou menos um dedo de altura). Feche a panela de pressão e deixe-a no fogo. Quando a panela começar a chiar, conte 10 min e desligue-a. Só abra a panela depois do esfriamento. Enquanto a panela estiver esfriando faça o meio de cultura, o qual é cozido lentamente com uma colher de pau, sendo mexida continuamente em círculo. Quando estiver no ponto (o meio fica borbulhando), distribua-o nas garrafas e tubos com uma colher e funil. Terminado este procedimento deixe novamente as garrafas e tubos na panela de pressão. Feche a panela e deixe até a panela começar a chiar, e conte 10 min. Deixe a panela esfriar e, em seguida, abra-a. Este meio só poderá ser usado após três dias.

Material necessário

• Panela de pressão
• Panela de alumínio
• Colher de pau
• Fogão
• Garrafas e tubos
• Rolhas
• Colher de sopa
• Balança
• Funil

A tabela abaixo deve ser preenchida com os ingredientes e suas respectivas quantidades.

Ingredientes	Quantidade
Fubá
Farinha de trigo integral
Sal
Açúcar
Nipagin ou tegosept
Água

Exercícios

1. Qual é a função do Nipagin?
2. Por que é necessário esterilizar garrafa, tubo e rolha?
3. Qual a razão para se usar o meio após três dias?
4. Para outras espécies de drosófila, ou até mesmo estoques de mutantes, o meio de cultura pode variar. Sugira uma explicação.
5. Que cuidados devemos tomar com as garrafas e tubos?
6. O que devemos escrever nas etiquetas?
7. Onde devemos deixar as garrafas e/ou tubos?
8. Após usar as garrafas, o que devemos fazer com elas?
9. Que meios de cultura de drosófila você conhece? Dica: vá até o “Google” e digite meio de cultura de drosófila.
10. O que é uma caixa de população de drosófila?
11. Meio de cultura mínimo e meio complexo: quando devemos utilizá-los?