POP ACIDO ÚRICO

FINALIDADE

Método para a determinação do ácido úrico. Teste enzimático colorimétrico, somente para uso diagnóstico in vitro.

PRINCÍPIO DE AÇÃO

Metodologia: Enzimático Colorimétrico (UOD-PAP).

A determinação enzimática do Ácido Úrico é feita de acordo com as seguintes reações:

Ácido Úrico + 2 H2O Uricase Alantoína + CO2 + H2O2

2 H2O2 + DHBS + 4-Aminoantipirina Peroxidase Cromógeno cereja + 4 H2O

A intensidade da cor cereja formada é diretamente proporcional à concentração de Ácido Úrico na amostra.

REAGENTE UTILIZADO

ÁCIDO ÚRICO MONOREAGENTE CATÁLOGO: K139 ANVISA: 10269360228

QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda.

Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca

CEP 31565-130 - Belo Horizonte - MG - Brasil

Tel.: [phone] – Fax: [phone]

e-mail: [e-mail]

site: www.bioclin.com.br

CNPJ: 19.400.787/0001-07 - Indústria Brasileira

COMPONENTES

Número 1 - Reagente Enzimático - Conservar entre 2 e 8ºC. Não congelar. Contém: Tampão 100 mmol/L (pH 7,5), 4-Aminoantipirina 2 mmol/L, Azida Sódica 7,69 mmol/L, Peroxidase > 18.000 U/L, Uricase > 3.000 U/L.

Número 2 - Padrão - Conservar entre 2 e 8ºC. Contém: Ácido Úrico 6,0 mg/dL.

ESTABILIDADE

Os reagentes são estáveis até a da data de validade impressa no rótulo quando conservados de acordo com a temperatura recomendada. Evitar a contaminação do produto durante o uso para não afetar a sua estabilidade.

CUIDADOS ESPECIAIS

1- Somente para uso diagnóstico in vitro.

2- Seguir com rigor a metodologia proposta para obtenção de resultados exatos.

3- A água utilizada na limpeza do material deve ser recente e isenta de agentes contaminantes.

4- Colunas deionizadoras saturadas liberam água alcalina, íons diversos e agentes oxidantes e redutores, que podem alterar de forma significativa os resultados.

5- O nível de água no banho-maria deve ser superior ao nível dos reagentes nos tubos de ensaio.

6- Manusear com cuidado o Reagente Nº 1, que contêm Azida Sódica, irritante para pele e mucosas.

7- O desenvolvimento de coloração discretamente rósea no Reagente de Trabalho não interfere em sua qualidade, desde que seja usado o branco correspondente e dosagens constantes do padrão.

8- Recomendamos aplicar as normas locais, estaduais e federais de proteção ambiental para que o descarte dos reagentes e do material biológico seja feito de acordo com a legislação vigente.

9- Para obtenção de informações relacionadas à biossegurança ou em caso de acidentes com o produto, consultar as FISPQ (Ficha de Informações de Segurança de Produtos Químicos) disponibilizadas no site www.bioclin.com.br ou através de solicitação pelo SAC (Serviço de Assessoria ao Cliente) da Quibasa.

EQUIPAMENTOS E INSUMOS OPERACIONAIS

Procedimento: Manual

Equipamento: Spectronic 21 – Milton Roy Company

Banho-maria : 37ºC

Pipetas e tubos de ensaio

Relógio ou cronômetro

AMOSTRA

Soro obtido livre de hemólise, plasma (colhido com heparina ou EDTA) e urina. O analito é estável no plasma, soro ou urina por 3 dias entre 2 e 8ºC, e 7 dias a 10ºC negativos.

TÉCNICA

A Bioclin recomenda, para uso do kit, utilizar como soro controle os kits Biocontrol N e P Bioclin.

PROCEDIMENTO MANUAL

Marcar 3 tubos de ensaio: B (Branco), A (Amostra), P (Padrão), e proceder como a seguir:

Branco Padrão Amostra

Amostra ------- ------- 25 µL

Reagente N° 2 ------- 25 µL -------

Reagente N° 1 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL

Homogeneizar bem e colocar em banho-maria 37ºC por 5 minutos. Ler a absorbância da Amostra e do Padrão em 505 nm (490 - 540 nm), acertando o zero com o Branco. A cor é estável por 30 minutos.

Urina de 24 horas - Preparo da amostra:

Anotar o volume (V) de urina de 24 horas em mL, homogeneizar, separar uma alíquota de 10 mL e acertar o pH entre 7 e 9 com NaOH 5%. Se a amostra estiver turva, aquecer em banho-maria por 10 minutos a 56ºC, para dissolução dos cristais. Diluir a urina 1:10 (100 mL de urina + 900 mL de água destilada ou deionizada). Multiplicar o resultado obtido por 10. Proceder a dosagem como descrito para o soro.

CÁLCULOS

Ácido Úrico ( mg/dL ) = Absorbância da amostra x 6,0

Absorbância do padrão

Como a reação segue a Lei de Lambert-Beer, o Fator de calibração pode ser usado.

Fator de calibração = Concentração do padrão (6,0 mg/dL)

Absorbância do padrão

mg/dL = Absorbância da amostra x Fator de calibração

Os resultados serão expressos em mg/dL.

Urina

Ácido Úrico (mg/24h) = mg/dL