Relatório de Bioquímica de Alimentos I

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Extração e Dosagem de Glicogênio Presente em Fígado Bovino

IFRJ – Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Rio de Janeiro.

Relatório de Bioquímica de Alimentos I.

Alunos: Gabriel Pires, Jade Paes e Samiri Gonzaga.

Professora: Marcia C. Silva.

Turma: AM 271.

Data da Prática: 03/05/2016.

1. Estrutura e Função do Glicogênio

Assim como o amido é nas células vegetais, o glicogênio é uma forma de armazenamento de açúcar nas células animais. Esse açúcar é a glicose, que é ligada em uma sequência de ligações glicosídicas 1,4 em sua cadeia, e ligações glicosídicas 1,6 nas ramificações. O glicogênio apresenta um alto peso molecular e é dividido em dois tipos: hepático e muscular. Nestes a principal diferença é a função.

O glicogênio hepático compõe 6% do fígado e é responsável por manter a manutenção da glicemia enquanto o corpo não está consumindo glicose, ou seja entre as refeições. Esse glicogênio sofre a glicogenólise para liberar moléculas de glicose para a célula. Tem uma grande importância pois mantém nosso nível energético no jejum, e existem partes do corpo (cérebro) que tem a glicose como única fonte de energia.

O glicogênio muscular, como o nome já diz, fica armazenado nos músculos e compõem cerca de 0,7% do mesmo. Ao contrário do hepático, esse glicogênio não será liberado para as demais partes do corpo. Esse glicogênio é utilizado como fonte de energia para o próprio músculo na contração muscular.

1. Objetivo

Determinar a quantidade de glicogênio e glicose presente em uma amostra de fígado bovino.

1. Concentração de Glicose em µmol/mL e em mg/Ml

Tabela 1 – Concentração de glicose e ABS do padrão

Concentração (µmol/mL)	Abs
2	0,179
4	0,379
6	0,565
8	0,75
10	0,916

Tabela 2 – Abs das amostras

	Duplicata 1	Duplicata 2	Média
Abs	0,681	0,684	0,6825

Figura 1 – Gráfico da Curva de Calibração de Glicose (µmol/mL)

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Equação da reta: y = 0,0923x + 0,0043

0,6825 = 0,0923x + 0,0043

X = [pic 3]

X = 7,347779µmol/mL

 Figura 2 – Gráfico da Curva de Calibração de Glicose (mg/mL)

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Equação da reta: y = 0,5125x + 0,0043

0,6825 = 0,5125x + 0,0043

X = [pic 5]

X = 1,323317 mg/mL

1. Massa de Glicogênio Expressa em Glicose por grama de Fígado

1,323317 mg/mL de glicose

Fator de diluição → 1:2

1,323317 mg/mL *2 = 2,64078mg/mL

2,64078mg/mL*100mL/1000 = 0,2640g de glicose em 100g de fígado

1. Etapas

5.1        Homogeneização do Tecido com TCA

A ação mecânica (liquidificador) juntamente com a ação do TCA separa o glicogênio das demais substâncias presentes no fígado, e o TCA também precipita as proteínas celulares, aumentando essa separação.

5.2        Adição de Etanol Gelado

Depois de separar o glicogênio devemos isolar ele. As demais moléculas presentes no fígado são pequenas e solúveis em etanol, o glicogênio é pouco solúvel no etanol e precipita. Além disso a solubilidade do glicogênio em etanol é ainda menor em baixas temperaturas, por isso o banho de gelo e o etanol gelado.

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