As Técnicas de Semeadura

INTRODUÇÃO

As técnicas de semeadura são métodos onde se introduz microorganismos ou material a ser analisado, como por exemplo: secreções, bactérias; para um outro meio de cultura. Onde se pode garantir que apenas o microorganismo desejado seja semeado, são utilizadas as técnicas assépticas: procedimentos que devem ser adotados visando a não contaminação de materiais, meios e culturas.

Tipos de Semeadura

Semeaduras em meios sólidos em tubos

[pic 1]

Estria sinuosa: semear com alça ou agulha bacteriológica em          

Zig-Zag

Objetivo: obtenção de intensa massa de microorganismos

[pic 2]

Estria Reta: semear com agulha bacteriológica, fazendo uma

linha reta.

Objetivo: obtenção de pequena massa de microorganismos.

[pic 3]

Sólido Inclinado: semear com agulha bacteriológica, no centro do

Agar.

Objetivo: é utilizado para verificar fermentação e motalidade em

algumas técnicas.

[pic 4]

Sólido Reto: semear com agulha bacteriológica, no centro do Agar.

Objetivo: é utilizado para verificar fermentação e motilidade em

algumas técnicas.

Semeaduras em meios sólidos em placas de Petri

[pic 5]

Pour-plate ou disseminação (método em profundidade): Transferir 1 ml da cultura para placa de Petri vazia, colocar 10 – 20 ml do meio fundido (e resfriado a cerca de 45 – 50°C) sobre a cultura e homogeneizar suavemente com movimentos circulares.

Objetivo: contagem bacteriana. É utilizado também para análise de microorganismos anaeróbios

Estria simples: transferir uma alçada da cultura para meio sólido em placa e estriar com a alça bacteriológica sobre o meio.
Objetivo: Essa técnica é muito utilizada para visualização de determinadas propriedades metabólicas, como a produção de enzimas hidrolíticas (hidrólise de substâncias do meio - gema de ovo, sangue...), e produção de pigmentos.[pic 6]

[pic 7]

Esgotamento em estrias ou estrias múltiplas: transferir uma alçada da cultura para meio sólido em placa e estriar com a alça bacteriológica sobre o meio. A placa é dividida em 4 quadrantes e a inoculação pode ser feita de 2 tipos:

    • 3 estrias: estriar em metade da placa, com movimentos de zig-zag. Quando atingir a metade, girar a placa 90° e estriar até a metade (1/4 da placa), girar mais 90° e estriar o meio restante. 
   • 4 estrias: estriar até 2/3 da metade da placa, girar 90°, estriar 2/3 do próximo quadrante (1/4 da placa), girar 90°, estriar mais 2/3 do próximo quadrante (1/4 da placa), girar 90° e estriar o restante do meio.

Objetivos:

Objetivo: obtenção de colônias isoladas. É importante não cruzar as estrias (não tocar a alça na estria anterior), para reduzir o inóculo a cada estria e obter as colônias isoladas.


Spread-plate ou distensão: Transferir 0,1 ml da cultura para o meio sólido na placa e espalhar uniformemente com a própria ponta da pipeta, ou alça bacteriológica / swab / alça Drigalsky.
Objetivo: obtenção de crescimento confluente, ou para contagem bacteriana.[pic 8]

Semeaduras em meios líquidos

Difusão: uma alçada da colônia (Agar em placa) ou da cultura (de outro meio ou líquido) é introduzida no meio líquido, com agitação da alça, para maior difusão dos microorganismos (da alça para o meio e homogeneização no meio).[pic 9]